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人骨形成蛋白2和人骨形成蛋白7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建
引用本文:吉建新,廖伟娇,刘利东,卢春生,朱伯平,范婷婷.人骨形成蛋白2和人骨形成蛋白7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建[J].广东医学,2010,31(4).
作者姓名:吉建新  廖伟娇  刘利东  卢春生  朱伯平  范婷婷
作者单位:1. 广州医学院第一附属医院,口腔科,广州,510120
2. 广州医学院第一附属医院,检验科,广州,510120
3. 广州医学院第一附属医院,输血科,广州,510120
基金项目:广东省社会发展领域科技计划项目(编号:2007B060401069);;广州市科技局攻关项目(编号:2007Z3-E0191);;广州市教育局项目(编号:61105)
摘    要:目的克隆和构建人骨形成蛋白2(BMP-2)和人骨形成蛋白7(BMP-7)成熟肽真核表达载体。方法采用Trizol法从人骨肉瘤细胞中提取制备总RNA,利用RT-PCR、PCR转录、扩增BMP-2和BMP-7获得成熟肽基因,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达重组子pcDNA3.1(+)/BMP-2MP和pcDNA3.1(+)/BMP-7MP。结果总RNA提取液电泳可见在28S、18S和5S处出现明显的条带,PCR和酶切可在439bp和364bp出现条带,阳性克隆测序结果与Genebank中登录的序列一致。结论成功克隆出人BMP-2MP和BMP-7MP基因,成熟肽基因已与pcDNA3.1(+)连接,成功构建其真核表达重组子pcDNA3.1/BMP-2MP和pcDNA3.1/BMP-7MP,为进一步研究BMP-2、BMP-7的功能及其成熟肽基因在骨髓间充质细胞(hMSCs)中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础。

关 键 词:骨形成蛋白-2  骨形成蛋白-7  基因克隆  真核表达载体  

Construction of Human BMP-2 and -7 Mature Peptide cDNA Expression Plasmids
JI Jian-xin,LIAO Wei-jiao,LIU Li-dong,LU Chun-sheng,ZHU Bo-ping,FAN Ting-ting.Construction of Human BMP-2 and -7 Mature Peptide cDNA Expression Plasmids[J].Guangdong Medical Journal,2010,31(4).
Authors:JI Jian-xin  LIAO Wei-jiao  LIU Li-dong  LU Chun-sheng  ZHU Bo-ping  FAN Ting-ting
Institution:JI Jian-xin,LIAO Wei-jiao,LIU Li-dong,LU Chun-sheng,ZHU Bo-ping,FAN Ting-ting.Department of Stomatology,the First Affiliated Hospital,Guangzhou Medical College,Guangzhou 510120,China
Abstract:
Keywords:bone morphogenetic protein 2  bone morphogenetic protein 7  gene cloning  eukaryotic expression vector  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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