HPLC波长切换法同时测定穴位敷贴方3种成分的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)波长切换法同时测定穴位敷贴方中芥子碱硫氰酸盐、6-姜辣素、细辛脂素含量。方法:采用HPLC法检测穴位敷贴方中芥子碱硫氰酸盐、6-姜辣素、细辛脂素含量,并进行方法学考察。选用Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液(三乙胺调节pH 7.0)为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,流速1.0 ml/min,紫外检测器0～17 min检测波长为326 nm,17～50 min切换波长为280 nm,进样量10μl。结果:芥子碱硫氰酸盐在2.789～178.5μg/ml、6-姜辣素在2.508～160.5μg/ml、细辛脂素在1.134～72.60μg/ml范围内线性关系良好;重复性实验,芥子碱硫氰酸盐、6-姜辣素、细辛脂素的RSD分别为1.20%、1.02%、0.69%;精密度实验,三者的RSD分别为0.50%、0.93%、0.90%;稳定性实验,三者的RSD分别为1.23%、1.05%、1.26%;三者的平均加样回收率分别为100.63%、98.44%、98.87%,RSD分别为2.00%、1.20%、1.10%,均符合测定要求。测得不同配比的组方中3种成分的含量存在明显差异。结论:该方法精密度高,重复性和稳定性好,可用于穴位敷贴方中以上成分的含量测定。