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20(S)-PPD促内质网应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡
引用本文:张学礼,韩志芬,夏花英,蒋嘉烨,张彤. 20(S)-PPD促内质网应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡[J]. 上海中医药大学学报, 2015, 29(3): 70-75
作者姓名:张学礼  韩志芬  夏花英  蒋嘉烨  张彤
作者单位:上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203,上海中医药大学教学实验中心上海201203,上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203,上海中医药大学教学实验中心上海201203,上海中医药大学教学实验中心上海201203
基金项目:上海市教委科研基金资助项目(2012JW02)
摘    要:目的:观察原人参二醇(protopanaxadiol,PPD)中20(S)-PPD对人脐静脉内皮细胞凋亡的作用并探讨其作用机制。方法:20(S)-PPD处理人脐静脉内皮细胞,MTT法检测细胞增殖,DAPI染色检测细胞核形态变化,Calpain活性检测试剂盒检测胞质Calpain活性,内质网荧光探针3,3-二己基恶羰花青碘化物染色检测细胞内质网形态变化,实时定量PCR检测拼接XBP-1以及CHOP mRNA水平,Western blot检测Caspase-3、Caspase-8、bax、bcl-2、ATF-6、磷酸化IRE1、磷酸化PERK、ATF-4以及CHOP蛋白水平。结果:20(S)-PPD 10μmol/L以上处理人脐静脉内皮细胞6 h或5μmol/L以上处理24 h均能显著抑制其细胞活力。20(S)-PPD 10μmol/L处理人脐静脉内皮细胞6 h后,DAPI染色发现细胞出现明显染色质固缩及核碎片;内质网荧光探针3,3-二己基恶羰花青碘化物染色显示内质网形态发生显著变化,出现内质网碎片并且在核周聚集成颗粒;胞质Calpain活性未见显著改变;Western blot检测到凋亡相关蛋白Caspase-3活性片段,Caspase-8表达水平无显著变化且未检出其活性片段,bax表达未见显著改变,而bcl-2表达显著下调,ATF-6表达未见显著改变,磷酸化IRE1显著增加;实时定量PCR结果显示拼接XBP-1s mRNA显著增加,磷酸化PERK及ATF-4显著增加,CHOP mRNA及蛋白水平显著增加。结论:20(S)-PPD通过内质网应激激活IRE1与PERK途径,进一步下调bcl-2而导致人脐静脉内皮细胞凋亡。

关 键 词:原人参二醇  内质网应激  人脐静脉内皮细胞  细胞凋亡
收稿时间:2014-11-21

20(S)-protopanaxadiol Activates ER Stress to Induce Cell Apoptosis in Human Umbilical Vein Endothelial Cells
ZHANG Xue-li,HAN Zhi-fen,XIA Hua-ying,JIANG Jia-ye and ZHANG Tong. 20(S)-protopanaxadiol Activates ER Stress to Induce Cell Apoptosis in Human Umbilical Vein Endothelial Cells[J]. Acta Universitatis Traditionis Medicalis Sinensis Pharmacologiaeque Shanghai, 2015, 29(3): 70-75
Authors:ZHANG Xue-li  HAN Zhi-fen  XIA Hua-ying  JIANG Jia-ye  ZHANG Tong
Affiliation:College of Basic Medicine of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Experiment Center for Teaching and Learning of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,College of Basic Medicine of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Experiment Center for Teaching and Learning of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine and Experiment Center for Teaching and Learning of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Abstract:
Keywords:protopanaxadiol   ER stress   human umbilical vein endothelial cells   apoptosis
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