百合知母汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用

目的]观察百合知母汤含药血清对氯化镉(CdCl2)致大鼠卵巢颗粒细胞(GC)损伤的影响.方法](1)分别选用23 d、3月和12月龄雌性sD大鼠各5只,取卵巢进行GC计数,连续观察10 d内GC的生长情况,采用噻唑蓝(MTT)比色法于490 nm波长处测定光密度(D)值,筛选最适卵巢GC.(2)于最适卵巢GC体外培养的第3天加入终浓度分别为10、20、40、60、80μmol/L的CdCl2刺激液,37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养48 h后,采用MTT法观察细胞生长情况,筛选CdCl2刺激液的最适浓度.(3)将筛选出最适的卵巢GC体外培养72 h后,在96孔板内分别加入最适浓度的CdCl2刺激液及终浓度分别为体积分数1.25%、2.5%、5%、10%、20%的大鼠百合知母汤含药血清,依据含药血清浓度由低至高分为5组,同时另设对照组:①空白对照组:体积分数10%DMEM培养液,②模型组:体积分数10%DMEM培养液+最适浓度CdCl2刺激液,③空白血清组:空白血清+最适浓度CdCl2刺激液.继续培养48 h后,采用MTT比色法测定D值,观察百合知母汤含药血清对大鼠卵巢GC以及对CdCl2致卵巢GC损伤后的影响.结果]23 d龄大鼠卵巢GC数量多、形态好,呈指数生长,23 d为最适生长时间.CdCl2浓度与卵巢GC的活性呈剂量依赖性关系,随浓度增加而损伤加重,其中浓度为40 μmol/L CdCl2培养液中的GC细胞边缘出现皱缩,为最适CdCl2刺激液浓度.百合知母汤含药血清对卵巢GC生长有促进作用,能抵抗40 μmol/L CdCl2刺激液对GC的损伤作用.结论]百合知母汤含药血清保护大鼠卵巢GC的作用与其能拮抗CdCl2的损伤和增加卵巢GC的活性和数量有关.

Serum Pharmacological Study of Baihe Zhimu Decoction in Protecting Rat Ovarian Granular Cells