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| 自噬基因Beclin1启动子细胞自噬模型的建立 | |
| 引用本文： | 黄凤媛,李菲,曾飞剑,李昀骏,侯秋科,黄俊铭,胡跃强,陈东风,黎辉.自噬基因Beclin1启动子细胞自噬模型的建立[J].广州中医药大学学报,2015,32(2):325-330,388. |
| 作者姓名： | 黄凤媛 李菲 曾飞剑 李昀骏 侯秋科 黄俊铭 胡跃强 陈东风 黎辉 |
| 作者单位： | 1. 广州中医药大学解剖学教研室,广东广州,510405 2. 广西中医药大学第一附属医院,广西南宁,530023 3. 广州中医药大学第三临床医学院,广东广州,510405 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(编号:81260530);广东省自然科学基金项目(编号:S2012010010406) |
| 摘 要： | 【目的】构建自噬基因Beclin1启动子报告基因细胞自噬模型,为筛选出以Beclin1为靶标的中药提供新的细胞模型。【方法】采用瞬时转染双荧光素酶报告基因测定法,确定最佳转染浓度、时间等条件,及Beclin1基因启动子转录活性细胞自噬模型的建立和验证,观察血清饥饿、过氧化氢氧化损伤及自噬激活剂雷帕霉素3种自噬刺激因素对Beclin1基因启动子转录活性PC12细胞自噬模型的影响。【结果】血清饥饿诱导12 h,Beclin1基因启动子转录活性是体积分数10%血清组的1.8倍,而血清饥饿诱导18、24 h与诱导12 h比较其转录活性无明显变化;300μmol/L过氧化氢诱导9 h,Beclin1基因启动子转录活性是0μmol/L过氧化氢组的1.3倍;雷帕霉素在浓度0.1、1 nmol/L可上调Beclin1基因启动子转录活性,并呈浓度依赖性,而5 nmol/L及更高浓度的雷帕霉素可下调Beclin1基因启动子转录活性。【结论】成功建立用Beclin1基因启动子报告基因检测Beclin1基因启动子转录活性特异性的细胞发生自噬模型,血清饥饿、过氧化氢、自噬激活剂雷帕霉素3种自噬刺激因素可诱导Beclin1基因启动子的转录活性。 |
| 关 键 词： | Beclin1基因启动子 转录活性 细胞模型 血清饥饿 氧化应激 自噬 细胞培养 |
Establishment of Autophagic Cell Model with Beclin1 Promoter Reporter Gene |
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| HUANG Fengyuan;LI Fei;ZENG Feijian;LI Yunjun;HOU Qiuke;HUANG Junming;HU Yueqiang;CHEN Dongfeng;LI Hui;LI Yiwei;DENG Rudong;ZHOU Jianhong;WEI Gang;HUANG Guihua.Establishment of Autophagic Cell Model with Beclin1 Promoter Reporter Gene[J].Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,2015,32(2):325-330,388. | |
| Authors: | HUANG Fengyuan;LI Fei;ZENG Feijian;LI Yunjun;HOU Qiuke;HUANG Junming;HU Yueqiang;CHEN Dongfeng;LI Hui;LI Yiwei;DENG Rudong;ZHOU Jianhong;WEI Gang;HUANG Guihua |
| Institution: | HUANG Fengyuan;LI Fei;ZENG Feijian;LI Yunjun;HOU Qiuke;HUANG Junming;HU Yueqiang;CHEN Dongfeng;LI Hui;LI Yiwei;DENG Rudong;ZHOU Jianhong;WEI Gang;HUANG Guihua;Dept.of Anatomy, Guangzhou University of Chinese Medicine;The First Affiliated Hospital of Guangxi University of Traditional Chinese Medicine;The Third Clinical Medical College, Guangzhou University of Chinese Medicine;New Drug Research &Development Center, Guangzhou University of Chinese Medicine; |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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