雷公藤红素诱导未折叠蛋白反应信号通路中真核细胞翻译起始因子2α活化抑制多发性骨髓瘤细胞生长

目的 研究雷公藤红素抑制多发性骨髓瘤细胞增殖与未折叠蛋白反应（UPR）的关系和分子机制，为多发性骨髓瘤的治疗提供新的药物靶点。方法 4种多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226、U266、SKO、KMS-11，经不同浓度雷公藤红素（增殖实验0.0～10.0 μmol/L、凋亡实验0.0～4.0 μmol/L、周期阻滞实验0.0～1.5 μmol/L）处理不同时间（增殖实验1～3 d、凋亡实验1 d、周期阻滞实验1 d）后，检测细胞增殖、凋亡、周期阻滞情况；用蛋白质印迹法检测肌醇需求酶1（IRE1）、蛋白激酶样内质网激酶（PERK）和活化转录因子6（ATF6）3条UPR信号通路中主要分子的表达，包括葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、ATF6、PERK、真核细胞翻译起始因子2α（eIF2α）、磷酸化eIF2α（p-eIF2α）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、IRE1、磷酸化IRE1（p-IRE1）。用慢病毒包被的含短发夹RNA（shRNA）载体对eIF2α表达进行干扰，观察雷公藤红素对干扰eIF2α表达后的RPMI 8226细胞UPR信号分子表达、凋亡和细胞周期的影响。结果 雷公藤红素以剂量和时间依赖方式抑制4种多发性骨髓瘤细胞增殖、诱导凋亡、使细胞周期阻滞在G₀/G₁期，其中RPMI 8226细胞对雷公藤红素最敏感。在RPMI 8226细胞，雷公藤红素处理浓度在0.5～2.0 μmol/L作用30 min～24 h时均能使UPR的PERK通路中p-eIF2α表达水平升高（P<0.05或P<0.01），其下游CHOP表达也相应增加（P<0.05或P<0.01），而对其他2条通路ATF6和IRE1影响不明显。用慢病毒干扰eIF2α表达后，雷公藤红素上调CHOP表达、诱导凋亡和周期阻滞的作用均减弱或消失。结论 雷公藤红素能抑制多种多发性骨髓瘤细胞增殖，活化UPR的PERK信号通路中eIF2α分子可能是其作用机制之一。