NF-κB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡和相关分子的表达 |
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作者姓名: | 樊浩 何松 汤为学 |
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作者单位: | 1. 重庆医科大学附属第二医院消化内科,重庆,400010 2. 重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室,重庆,400010 |
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摘 要: | 目的 探讨NF-kB沉默联合苦参碱(matrine,MT)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及相关分子的表达.方法 构建NF-kB/P65 siRNA真核表达载体转染人肝癌细胞HepG2,RT-PCR检测NF-kB/P65基因沉默效果,并筛选出NF-kB/P65基因沉默稳定转染细胞株.将实验分为对照组、苦参碱组(1.5 g/L)、稳转细胞组和联合组(稳转细胞十苦参碱),流式细胞仪检测细胞凋亡率;分别用RT-PCR法和蛋白质印迹法检测细胞NF-kB/P65、CD95(Fas)、Smac、Survivin的mRNA和蛋白水平表达.结果 苦参碱组NF-kB/P65、CD95、Smac和Survivin的表达上调,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);稳转细胞组CD95和Smac的表达上调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),NF-kB/P65和Survivin的表达下调,与对照组、苦参碱组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组CD95和Smac的表达上调,与对照组、苦参碱组、稳转细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05),NF-kB/P65和Survivin的表达下调,与苦参碱组比较差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞凋亡率分别为3.21%、6.25%、11.82%、21.06%,组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 NF-kB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡可能与CD95和Smac的表达上调及NF-kB/P65和Survivin的表达下调有关.
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关 键 词: | 苦参碱 NF-kB 细胞凋亡 CD95 Smac Survivin |
收稿时间: | 2012-09-30 |
修稿时间: | 2013-01-16 |
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