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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定抑郁大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸
作者姓名:陈磊  杜毅  李盛建  周瑾  蔡溱
作者单位:1. 海军军医大学(第二军医大学)长海医院药材科, 上海 200433;2. 上海交通大学医学院附属新华医院药学部, 上海 200092;3. 海军军医大学(第二军医大学)东方肝胆外科医院药材科, 上海 200438*通信作者
摘    要:目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,同时检测抑郁模型大鼠脑脊液中5-羟色胺及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的水平,并观察氟西汀治疗后抑郁模型大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-HIAA的含量变化。方法 将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组和氟西汀治疗组,每组8只。造模第35天,待行为学测试后取大鼠脑脊液,用蛋白沉淀法进行前处理,然后采用UPLC-MS/MS测定5-羟色胺和5-HIAA的含量。色谱柱为ACE C18-PFP柱(4.6 mm×150 mm,3 μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温为25℃,质谱检测采用动态多反应监测(DMRM)模式。结果 大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-HIAA分别在0.10~100.00 ng/mL和1.00~1 000.00 ng/mL浓度范围内线性关系良好(r>0.999),日内和日间精密度均<15.00%,提取回收率为86.86%~98.49%,基质效应为89.80%~95.25%,样品稳定性良好。与对照组比较,模型组大鼠脑脊液中5-羟色胺的含量降低(P<0.01),5-HIAA含量上升(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组大鼠脑脊液中5-羟色胺含量上升(P<0.01),5-HIAA含量降低(P<0.01)。结论 本实验所建立的方法操作简便,结果准确,灵敏度高,重现性好,适用于检测抑郁大鼠脑脊液中5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸水平。

关 键 词:超高效液相色谱法  串联质谱法  抑郁  脑脊液  5-羟色胺  5-羟吲哚乙酸
收稿时间:2018/6/5 0:00:00
修稿时间:2018/7/9 0:00:00

Simultaneous determination of 5-hydroxytryptamine and 5-hydroxyindoleacetic acid in cerebrospinal fluid of depressive rats by ultra high performance liquid chromatography-tandem quadrupole mass spectrometry
Authors:CHEN Lei  DU Yi  LI Cheng-jian  ZHOU Jin and CAI Zhen
Institution:1. Department of Pharmacy, Changhai Hospital, Navy Medical University(Second Military Medical University), Shanghai 200433, China;2. Department of Pharmacy, Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200092, China;3. Department of Pharmacy, Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital, Navy Medical University(Second Military Medical University), Shanghai 200438, China*Corresponding author
Abstract:
Keywords:ultra high performance liquid chromatography  tandem quadrupole mass spectrometry  depression  cerebrospinal fluid  5-hydroxytryptamine  5-hydroxyindoleacetic acid
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