一种从唾液中快速提取基因组DNA的方法 |
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作者姓名: | 杨泽民 林静 陈龙辉 张敏 陈蔚文 |
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作者单位: | 1. 广东药学院基础学院生物化学与分子生物学系,广州,510006 2. 广州中医药大学脾胃研究所,广州,510405 3. 广州市海珠区妇幼保健院中医科,广州,510240 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(NO. 81102703),广东省科技计划项目(No. 2013A032500005),广东省中医药管理局项目(No. 20123001),广东药学院基础学院教改项目。Supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 81102703), Science and Technology Planning Project of Guangdong Province (No. 2013A032500005) and Administration of Traditional Chinese Medicine of Guangdong Province in China (No. 20123001). Teaching Reform Project of School of Basic Courses in Guangdong Pharmaceutical University. |
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摘 要: | 目的 探索一种快速、有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法.方法 比较碘化钾法和口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53、PRB-3基因PCR扩增效果.同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验证碘化钾法提取唾液基因组DNA的稳定性.结果 两种DNA提取方法都能从新鲜唾液标本中获得高质量的基因组DNA,其中碘化钾法的得率和D260/D280分别为(1.91±0.15) μg和1.99±0.05,试剂盒法分别为(2.64±0.34) μg和1.81±0.02.对于室温放置1周的唾液标本,两种提取方法获得的DNA虽然降解明显,但是对TP53和PRB-3基因都能扩增正确大小的目的片段.碘化钾法提取的99名健康儿童和成人的唾液基因组DNA虽然个体差异明显得率为(1.89±0.46) μg],但是DNA质量稳定可靠(D260/D280为1.96±0.10).结论 碘化钾法提取唾液基因组DNA不仅廉价、高效,而且对人体无创伤,非常适合大范围分子流行病学研究.
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关 键 词: | 唾液 碘化钾 DNA提取 聚合酶链反应 |
收稿时间: | 2014/5/20 0:00:00 |
修稿时间: | 2014/7/17 0:00:00 |
A method for fast genomic DNA extraction from saliva and its application |
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Authors: | YANG Ze-min LIN Jing CHEN Long-hui ZHANG Min and CHEN Wei-wen |
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Institution: | School of Basic Courses,Guangdong Pharmaceutical University,School of Basic Courses,Guangdong Pharmaceutical University,Pi-Wei Institute,Guangzhou University of Chinese Medicine,Pediatrics of Traditional Chinese Medicine,Haizhu Maternal and Child health Hospital,Pi-Wei Institute,Guangzhou University of Chinese Medicine |
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Abstract: | |
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Keywords: | saliva KI DNA extraction PCR amplification |
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