| EGFP Kallikrein重组真核表达载体的构建及其在兔内皮祖细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 姜虹,李大庆,张运,刘春喜,冯进波,王荣.EGFP Kallikrein重组真核表达载体的构建及其在兔内皮祖细胞中的表达[J].山东大学学报(医学版),2006,44(6):576-579. |
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| 作者姓名： | 姜虹 李大庆 张运 刘春喜 冯进波 王荣 |
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| 作者单位： | 山东大学齐鲁医院心内科暨心血管重构与功能教育部重点实验室,山东,济南,250012 |
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| 摘 要： | 目的：构建携带人组织激肽释放酶（tHK）基因，以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体,并导入内皮祖细胞(EPCs)中表达，验证tHK基因修饰EPCs用于血管病治疗的可行性。方法：PCR扩增tHK目的基因，将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP N3上，构建重组质粒载体。并利用脂质体转染体外培养的EPCs，在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察tHK EGFP融合蛋白在细胞中的表达；用RT PCR 方法验证tHK在mRNA水平的表达；用ELISA方法验证tHK蛋白水平的表达。结果：酶切和测序证实pEGFP Kallikrein重组质粒构建正确，重组质粒载体在EPCs 中获得了表达,表达的融合蛋白具有tHK 和EGFP 的双重活性。结论：通过基因克隆方法成功构建了pEGFP Kallikrein重组质粒载体，并且在EPCs 中稳定表达，为进一步研究tHK基因修饰EPCs双重治疗血管病的技术策略奠定了基础。
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| 关 键 词： | 激肽释放酶类 内皮 干细胞 基因转移技术 |
| 文章编号： | 1671-7554（2006）06-0576-04 |
| 收稿时间： | 2005-06-29 |
| 修稿时间： | 2005年6月29日 |
Construction of pEGFP-Kallikrein expression vector and its expression in endothelial progenitor cells in rabbit |
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| JIANG Hong,LI Da-qing,ZHANG Yun,LIU Chun-xi,FENG Jin-bo,WANG Rong.Construction of pEGFP-Kallikrein expression vector and its expression in endothelial progenitor cells in rabbit[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2006,44(6):576-579. |
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| Authors: | JIANG Hong LI Da-qing ZHANG Yun LIU Chun-xi FENG Jin-bo WANG Rong |
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| Institution: | Department of Cardiology, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kallireins Endothelium Stem Cells Gene Transfer Techniques |
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