| 小鼠B7-H4重组蛋白的表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 钱韵,姚航平,程林芳,沈玲,古丽娟,陶岚,张立煌.小鼠B7-H4重组蛋白的表达及鉴定[J].浙江大学学报(医学版),2009,38(2). |
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| 作者姓名： | 钱韵 姚航平 程林芳 沈玲 古丽娟 陶岚 张立煌 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学免疫学研究所,浙江,杭州,310058
2. 浙江大学医学院附属第一医院,浙江,杭州,310003 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的:构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体,转染酵母细胞以表达mB7-H4,并检测其生物学活性.方法:以mB7-H4的重组质粒为模板,在克隆引物上加入Xho I和EcoR I酶切位点,并用PCR方法扩增得到mB7-H4胞外区的基因片段,经Xho I和EcoR I双酶切后接入酵母表达载体Ppic9上,构建成Ppic9-mB7-H4重组质粒.经双酶切和核酸测序鉴定,将该重组质粒转染至酵母细胞,用PCR、Western Blot及ELISA等方法检测重组基因的表达,并鉴定表达蛋白的生物学活性.结果:转染Ppic9-mB7-H4重组质粒的酵母细胞内表达mB7-H4,诱导表达的mB7-H4能有效抑制CD3单抗活化的T淋巴细胞的增殖(相对抑制率为28.3%)和IL-2(相对抑制率为68.8%)、IL-4(相对抑制率为78.8%)、IL-10(相对抑制率为67.6%)、IFN-γ(相对抑制率为77.7%)等细胞因子的分泌.结论:成功构建了mB7-H4真核表达系统,并获得了有生物学活性的mB7-H4分子.
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| 关 键 词： | 遗传载体 重组蛋白质类 重组 表达 免疫抑制 |
Expression and identification of recombinant mouse gene B7-H4 |
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| QIAN Yun,YAO Hang-ping,CHENG Lin-fang,SHEN Ling,GU Li-juan,TAO Lan,ZHANG Li-huang.Expression and identification of recombinant mouse gene B7-H4[J].Journal of Zhejiang University(Medical Sciences),2009,38(2). |
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| Authors: | QIAN Yun YAO Hang-ping CHENG Lin-fang SHEN Ling GU Li-juan TAO Lan ZHANG Li-huang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mB7-H4 |
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