| 鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化 |
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| 引用本文： | 骆江云,张壮,余舒莹,赵冰,赵春贞,王欣欣,方三华,张纬萍,张丽慧,魏尔清,卢韵碧.鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化[J].浙江大学学报(医学版),2011,40(2). |
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| 作者姓名： | 骆江云 张壮 余舒莹 赵冰 赵春贞 王欣欣 方三华 张纬萍 张丽慧 魏尔清 卢韵碧 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学医学院药理学系,浙江杭州,310058
2. 杭州师范大学医学神经生物学市级重点实验室、基础医学部药理学教研室,浙江杭州,310036 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30700150,30873053,81072618); 浙江省自然科学基金资助项目(Y2090069); 浙江省科技厅钱江人才项目(2010R10055); 中央高校基本科研业务费专项资金 |
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| 摘 要： | 目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性。用新制备的抗体以Western blotting检测鱼藤酮(0.01～1μmol/L,作用24 h)损伤BV2细胞过程中,BV2细胞上CysLT1受体的表达变化,并以RT-PCR检测验证CysLT1受体mRNA表达水平,同时以免疫组化观察CysLT1受体的亚细胞分布变化。结果:ELISA测定显示,制备的兔抗小鼠CysLT1受体抗体的效价大于1/32728,对CysLT1受体的特异性强,对CysLT2受体和GPR17基本无交叉反应。Western blotting和RT-PCR显示,鱼藤酮作用BV2细胞24 h剂量依赖性诱导CysLT1受体mRNA及蛋白水平表达升高;免疫组化显示在鱼藤酮诱导BV2细胞损伤过程中,随鱼藤酮剂量增加,CysLT1受体发生核移位。结论:制备的CysLT1受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blott...
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| 关 键 词： | 半胱氨酸 受体 白三烯 抗体 鱼藤酮/药理学 半胱氨酰白三烯受体 多克隆抗体 BV2小胶质细胞 |
Rotenone-induced changes of cysteinyl leukotriene receptor 1 expression in BV2 microglial cells |
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| LUO Jiang-yun,ZHANG Zhuang,YU Shu-ying,ZHAO Bing,ZHAO Chun-zhen,WANG Xin-xin,FANG San-hua,ZHANG Wei-ping,ZHANG Li-hui,WEI Er-qing,LU Yun-bi.Rotenone-induced changes of cysteinyl leukotriene receptor 1 expression in BV2 microglial cells[J].Journal of Zhejiang University(Medical Sciences),2011,40(2). |
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| Authors: | LUO Jiang-yun ZHANG Zhuang YU Shu-ying ZHAO Bing ZHAO Chun-zhen WANG Xin-xin FANG San-hua ZHANG Wei-ping ZHANG Li-hui WEI Er-qing LU Yun-bi |
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| Institution: | LUO Jiang-yun,ZHANG Zhuang,YU Shu-ying,ZHAO Bing,ZHAO Chun-zhen,WANG Xin-xin,FANG San-hua,ZHANG Wei-ping,ZHANG Li-hui,WEI Er-qing,LU Yun-bi(Department of Pharmacology,College of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cysteine Receptors leukotriene Antibodies Rotenone/pharmacol Cysteinyl leukotriene receptor Polyclonal antibody BV2 microglia |
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