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APRIL siRNA表达载体构建、微流控芯片筛选及转染优化
引用本文:丁伟峰,王惠民,鞠少卿,毛丽萍,陆建荣,祝文彩.APRIL siRNA表达载体构建、微流控芯片筛选及转染优化[J].中国交通医学杂志,2007,21(3):238-241.
作者姓名:丁伟峰  王惠民  鞠少卿  毛丽萍  陆建荣  祝文彩
作者单位:[1]南通大学附属医院检验医学中心,江苏226001 [2]南通市第三人民医院,江苏226001
摘    要:目的:构建增殖诱导配体(APRIL)异构体特异性siRNA质粒载体,利用微流控芯片电泳筛选APRIL异构体特异性siRNA表达质粒。方法:以高表达APRIL的人结肠癌细胞株SW480为肿瘤细胞模型,选择APRIL异构体特异性siRNA序列,微流控芯片电泳筛选siRNA表达质粒并经测序后转染SW480细胞,半定量RT-PCR法检测瞬时转染前后SW480细胞中APRILmRNA水平。结果:成功构建hOligo637、hOligo1450、hOligo1534、hOligo1750。微流控芯片电泳成功分辨出被双酶切的插入片段。瞬时转染SW480细胞后均产生特异性的mRNA抑制效应。结论:采用微流控芯片电泳成功筛选出APRIL为靶点的siRNA质粒,并可广泛应用于筛选siRNA质粒。

关 键 词:RNA干扰  增殖诱导配体  质粒载体  微流控芯片电泳
文章编号:1006-2440(2007)03-0238-04
收稿时间:2007-03-09
修稿时间:2007-03-09

Construction of APRIL isoform-specific siRNA expression vector, screening by microfluidic chip electrophoresis and transfection optimization
DING Weifeng, WANG Huimin, JU Shaoqing, et al.Construction of APRIL isoform-specific siRNA expression vector, screening by microfluidic chip electrophoresis and transfection optimization[J].Chinese Medical JOurnal of Communications,2007,21(3):238-241.
Authors:DING Weifeng  WANG Huimin  JU Shaoqing  
Abstract:
Keywords:RNA interference  APRIL  Plasmid vector  Microfluidic chip electrophoresis
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