| 凋亡蛋白抑制因子livin基因siRNA表达载体的构建与转染 |
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| 引用本文： | 王旭东,丁伟峰,鞠少卿,王惠民.凋亡蛋白抑制因子livin基因siRNA表达载体的构建与转染[J].南通医学院学报,2007,27(2):92-94. |
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| 作者姓名： | 王旭东 丁伟峰 鞠少卿 王惠民 |
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| 作者单位： | 南通大学附属医院检验医学中心,南通,226001 |
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| 摘 要： | 目的:构建3个针对凋亡蛋白抑制因子livin基因mRNA的小干扰RNA(siRNA)表达载体,然后转染HCT-8/V细胞。为研究livin基因沉默对HCT-8/V细胞耐长春新碱特性的影响奠定基础。方法:合成3对靶基因livin的siRNA寡核苷酸序列通过退火生成转录模板,与线性pGCsi-H1/Neo/GFP质粒连接,转化DH5α钙化菌抽提重组质粒,测序鉴定。用脂质体2000将重组质粒转染HCT-8/V细胞并用G418筛选。结果:转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计、合成的livin的siRNA转录模板序列一致;在荧光显微镜下观察到HCT-8/V细胞表达绿色荧光蛋白(GFP)证实重组质粒已转染入细胞并用G418剔除了未转染质粒的细胞。结论:成功构建livin基因的siRNA表达载体,转染并筛选出转染了livin siRNA表达载体的HCT-8/V细胞。
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| 关 键 词： | 小干扰核糖核酸 质粒 凋亡蛋白抑制因子 转染 |
| 文章编号： | 1000-2057（2007）02-0092-03 |
| 修稿时间： | 2006-12-29 |
Construction and transfection of expression vectors of siRNA for inhibitor of apoptosis protein |
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| WANG Xudong, DING Weifeng, JU Shaoqin, et al.Construction and transfection of expression vectors of siRNA for inhibitor of apoptosis protein[J].ACTA Academiae Medicinae Nantong,2007,27(2):92-94. |
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| Authors: | WANG Xudong DING Weifeng JU Shaoqin |
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| Institution: | Clinical Laboratory, Affiliated Hospital of Nantong University, Nantong 226001 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Small interfering ribonudeoacid Plasmid Inhibitor of apoptosis protein Transfection |
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