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| 非神经源性细胞中tau蛋白的稳定表达及磷酸化 | |
| 引用本文： | 冯利杰,李琪,方辉,王海萍,粱燕,沈玉先.非神经源性细胞中tau蛋白的稳定表达及磷酸化[J].安徽医科大学学报,2007,42(2):119-123. |
| 作者姓名： | 冯利杰 李琪 方辉 王海萍 粱燕 沈玉先 |
| 作者单位： | 1. 安徽医科大学临床药理研究所、教育部"重要遗传疾病基因资源利用"重点实验室(省部共建),合肥,230032 2. 安徽医科大学基础医学院神经生物学教研室,合肥,230032 3. 中国科技大学神经生物学系神经退行性疾病研究室,合肥,230026 |
| 基金项目： | 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(编号:NCET-04-0589)，教育部重点项目(编号:206067)，安徽省高校青年教师科研资助计划项目(自然科学,编号:2006jq1095) |
| 摘 要： | 目的建立稳定表达tau蛋白的稳转细胞系,并观察tau蛋白的过度磷酸化对稳转的非神经源性细胞形态和活性的影响。方法构建pEGFP-C1-tau真核细胞表达质粒,建立稳转和表达融合蛋白GFP-tau的293T细胞系,并用不同浓度的蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸(OA)处理细胞以诱导其过度磷酸化,通过荧光显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法监测细胞的活性及免疫印迹法检测tau蛋白的表达及磷酸化水平。结果成功地建立了稳定表达GFP-tau蛋白的非神经源性稳转细胞系,该细胞系在稳转后3~4周,细胞生长状态良好,细胞形态和突起生长基本正常。用OA处理后,细胞突起消失、变圆,贴壁性能差,死亡的细胞数量也增多,这些变化随着OA作用时间的延长或浓度的增加更加明显;MTT法显示细胞的增殖活性明显下降;免疫印迹法提示,100nmol/LOA作用8h后,磷酸化tau水平增加。结论对于稳定表达tau蛋白的非神经源性细胞,OA可降低其增殖活性,该作用可能与OA抑制细胞内去磷酸化过程有关。 |
| 关 键 词： | tau病变 tau蛋白质类 磷蛋白磷酸酶/拮抗剂和抑制剂 转染 |
| 文章编号： | 1000-1492（2007）02-0119-05 |
| 收稿时间： | 2006-12-27 |
| 修稿时间： | 12 27 2006 12:00AM |
Overexpression and hyperphosphorylation of tau protein in stably transfected 293T cells |
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| Feng Lijie, Li Qi, Fang Hui,et al.Overexpression and hyperphosphorylation of tau protein in stably transfected 293T cells[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2007,42(2):119-123. | |
| Authors: | Feng Lijie Li Qi Fang Hui |
| Institution: | Institute of Clinical Pharmacology, Anhui Medical University, Hefei 230032 |
| Abstract: | |
| Keywords: | tauopathies tau proteins phosphoprotein phosphatase/antagonists and inhibitors transfection |
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