Eya1基因过表达对MES23.5细胞凋亡的影响

目的 构建眼发育缺失1(Eya1)基因慢病毒载体，并探讨过表达Eya1对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的鼠多巴胺能神经元细胞MES23.5凋亡的影响。方法 构建过表达Eya1基因的慢病毒，并感染MES23.5细胞，筛选稳定表达Eya1的细胞株；6-OHDA药物处理诱导MES23.5多巴胺能细胞损伤模型，分为对照组、空载体组、过表达Eya1组；采用CCK-8法检测细胞活力、细胞凋亡Hoechst染色(Hoechst 33258)和Western blot检测过表达Eya1对细胞凋亡的影响。结果 酶切电泳显示目的基因重组至慢病毒载体，测序结果表明构建的Eya1基因过表达载体与Eya1基因编码序列完全一致；CCK-8显示6-OHDA药物处理后过表达Eya1组的细胞活力水平高于对照组(P<0.05);Hoechst 33258染色显示过表达Eya1组的细胞核浓缩聚集水平低于对照组；且过表达Eya1组中Bcl-2蛋白的表达高于对照组(P<0.05),Bax蛋白的表达低于对照组(P<0.05)。结论 成功构建了过表达Eya1的MES23.5细胞株，Eya1通过调控Bcl-2、...