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TMEM88真核表达质粒的构建及其功能研究
引用本文:倪升丽,胡富勇,李增,孟晓明,王学富,徐涛.TMEM88真核表达质粒的构建及其功能研究[J].安徽医科大学学报,2017,52(6).
作者姓名:倪升丽  胡富勇  李增  孟晓明  王学富  徐涛
作者单位:安徽医科大学附属合肥医院(合肥市第二人民医院)肿瘤放疗科,合肥,230011;安徽医科大学药学院,合肥,230032
基金项目:合肥市科技攻关计划项目,安徽医科大学博士科研资助基金,安徽高校自然科学研究重点项目
摘    要:目的 构建TMEM88的真核表达质粒,并研究其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 提取人肝星状细胞的总RNA,逆转录成cDNA作为模板,利用PCR法扩增出TMEM88的CDS序列,双酶切后连接到pEGFP-C2载体上,然后进行转化、质粒抽提、酶切鉴定,最后挑取阳性克隆送生物公司测序.将pEGFP-C2-TMEM88真核表达质粒分别转染至人肝癌细胞株SMMC-7721中,通过MTT实验和流式细胞术检测其对细胞增殖和凋亡的影响.结果 测序结果显示pEGFP-C2-TMEM88真核表达质粒构建成功;MTT实验结果显示,过表达组细胞的增殖率为(0.625±0.07),显著低于正常组的(0.880±0.09)(P<0.05);流式细胞术结果显示,过表达组细胞的凋亡率为22.1%,显著高于正常组的9.1%.结论 TMEM88能够显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并促进其凋亡,为进一步了解TMEM88的功能、寻求肝癌治疗的新方向奠定了基础.

关 键 词:TMEM88  转染  增殖  凋亡

Construction of TMEM88 eukaryotic expression plasmid and its function research
Abstract:
Keywords:TMEM88  transfection  proliferation  apoptosis
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