| 三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响 |
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| 引用本文： | 周文明,赵建龙,曹慧敏,张学军.三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响[J].安徽医科大学学报,2003,38(6):432-434. |
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| 作者姓名： | 周文明 赵建龙 曹慧敏 张学军 |
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| 作者单位： | 1. 安徽医科大学皮肤性病研究所、第一附属医院皮肤性病科,合肥,230022
2. 中国科学院上海微系统与信息技术研究所,上海,200050 |
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| 基金项目： | 中国科学院生物科学与生物技术研究特别支持费课题 (编号 :STZ 0 0 0 3 ) |
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| 摘 要： | 目的 观察标记引物法、随机渗入标记法、末端转移标记法三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响。方法 将淋球菌gyrA基因91位密码子突变型探针倍比稀释成终浓度为1000／μmol／L～0．25μmol／L的梯度浓度点样并制作寡核苷酸芯片，PCR扩增荧光标记包含gyrA基因突变的目的DNA片段，与芯片杂交，分别记录三种标记方法的杂交信号强度。结果 标记引物法的荧光信号最强，随机渗入标记法的荧光信号强度次之，其Cy5—duTP最佳浓度为0．1mmol／L(dTTP：Cy5—dUTP=10：1)，末端转移标记法反应时间在60min和120min时荧光信号值相近。点样的探针浓度达到31μmol／L，以上，荧光信号为平台期。结论 明确了三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响，有助于选择寡核苷酸芯片的荧光标记方法。
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| 关 键 词： | 荧光标记法 寡核苷酸芯片 杂交信号 标记引物法 随机渗入标记法 末端转移标记法 |
| 文章编号： | 1000-1492(2003)06-0432-03 |
| 修稿时间： | 2003年5月5日 |
The impact of three fluorescence marker methods to oligonucleotide microarray hybridize signal |
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| Zhou Wenming,Zhao Jianlong,Cao Huimin et al.The impact of three fluorescence marker methods to oligonucleotide microarray hybridize signal[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2003,38(6):432-434. |
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| Authors: | Zhou Wenming Zhao Jianlong Cao Huimin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | oligonucleotide hybridize biological markers |
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