| 胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定 |
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| 引用本文： | 李云龙,郭欣,杨晓波,黄跃南.胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定[J].哈尔滨医科大学学报,2012,46(3):222-226. |
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| 作者姓名： | 李云龙 郭欣 杨晓波 黄跃南 |
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| 作者单位： | 李云龙 (哈尔滨医科大学附属第二医院普外科,黑龙江哈尔滨,150081) ； 郭欣 (哈尔滨医科大学附属第一医院普外科,黑龙江哈尔滨,150001) ； 杨晓波 (哈尔滨医科大学附属第二医院普外科,黑龙江哈尔滨,150081) ； 黄跃南 (哈尔滨医科大学附属第二医院普外科,黑龙江哈尔滨,150081) ； |
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| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的建立胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法。方法采用胰酶和胶原酶Ⅳ、P消化法分离获得细胞,在含10%胎牛血清的M199培养基中行导管上皮细胞原代培养,而后将血清浓度提高到20%以上继续培养,3～4天后至每个小圆细胞形成一个集落;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)的方法对获得的细胞检测CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的表达。结果成功分离获得胎猪胰腺导管细胞,并证实该细胞为胎猪导管源胰腺干细胞。经检测,细胞表达CK19,Pdx-1,Glut-2,NeuroD/Beta2等胰腺干细胞的标志,而insulin、Neurogenin3阴性表达。结论该方法可较好地分离纯化出胎猪胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性。
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| 关 键 词： | 胎猪 导管细胞 干细胞 胰岛素 |
Isolation,purification,cultivation and identification of porcine fetus pancreatic duct stem cells in vitro |
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| LI Yun-long,GUO Xin,YANG Xiao-bo,HUANG Yue-nan.Isolation,purification,cultivation and identification of porcine fetus pancreatic duct stem cells in vitro[J].Journal of Harbin Medical University,2012,46(3):222-226. |
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| Authors: | LI Yun-long GUO Xin YANG Xiao-bo HUANG Yue-nan |
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| Institution: | 1(1.Department of General Surgery,The Second Affiliated Hospital of Harbin Medical University,Harbin 150081,China;2.Department of General Surgery,The First Affiliated Hospital of Harbin Medical University,Harbin 150001,China) |
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