| 一步法分离石蜡切片DNA的改进与鉴定 |
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| 引用本文： | 彭剑桥,雷 平,杨 秦,朱 敏.一步法分离石蜡切片DNA的改进与鉴定[J].南华大学学报(医学版),2015,43(6):698-702. |
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| 作者姓名： | 彭剑桥 雷 平 杨 秦 朱 敏 |
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| 作者单位： | （1.湖南省人民医院检验科，湖南 长沙 410005；2.湖南省人民医院临床输血科； |
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| 基金项目： | 湖南省科技计划（2010FJ3084）；中南大学学位与研究生教育教学改革研究（2340-74333003019）；中南大学教师科研基金（2013JSJJ042）. |
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| 摘 要： | 目的 改进一种以含蛋白酶K的裂解液作用于石蜡包埋处理的细胞、分离DNA粗提液用于PCR扩增的实验方案。方法 石蜡包埋组织切片经常规脱蜡处理，用蛋白酶K裂解液洗脱细胞，55 ℃消化3 h后离心，吸取上清液；分光光度法检测DNA酶裂解液质量和浓度；以之为模板分别扩增人线粒体基因微卫星多态D310区、ATPase6基因区和核基因HBB、BRCA1等的DNA片段，琼脂糖凝胶电泳检测分析PCR扩增情况，并测序验证扩增产物。结果 以石蜡切片的DNA裂解粗提液为模板，扩增目的DNA片段阳性率可达100%；获得序列分析验证。结论 改进的蛋白酶K裂解液一步洗脱消化法操作简单、过程快捷、费用低廉，能快速有效地分离石蜡组织切片DNA，用于后续PCR扩增检测，具有较高效率。
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| 关 键 词： | DNA分离 石蜡包埋组织切片 线粒体DNA 核基因 |
| 收稿时间： | 2015/8/21 0:00:00 |
DNA Isolation from Paraffin Sections by an Adjusted One-Step Protocol and its Qualification Test by PCR |
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| PENG Jianqiao,LEI Ping,YANG Qin,et al.DNA Isolation from Paraffin Sections by an Adjusted One-Step Protocol and its Qualification Test by PCR[J].Journal of Nanhua University(Medical Edition),2015,43(6):698-702. |
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| Authors: | PENG Jianqiao LEI Ping YANG Qin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | DNA extraction paraffin-embedded sections mitochondrial DNA nuclear gene |
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