沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定 |
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引用本文: | 彭昕珂,彭波,陈超群,贺庆芝,陈丽丽,孙豫辉,陆春雪.沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定[J].南华大学学报(医学版),2016(6):625-629. |
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作者姓名: | 彭昕珂 彭波 陈超群 贺庆芝 陈丽丽 孙豫辉 陆春雪 |
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作者单位: | 南华大学病原生物学研究所,湖南 衡阳421001,南华大学肿瘤研究所,南华大学病原生物学研究所,湖南 衡阳421001,南华大学病原生物学研究所,湖南 衡阳421001,南华大学病原生物学研究所,湖南 衡阳421001,南华大学病原生物学研究所,湖南 衡阳421001,南华大学病原生物学研究所,湖南 衡阳421001 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.81202374和No.81471969)及2015年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目联合资助. |
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摘 要: | 目的 采用pGEX-6p载体原核表达沙眼衣原体(Ct)巨噬细胞感染增强因子(MIP),进一步纯化后免疫小鼠,评价该蛋白作为Ct疫苗候选抗原的可行性。方法聚合酶链反应技术从Ct D型基因组扩增MIP编码基因,构建pGEX-6p-1/MIP重组质粒并转化大肠杆菌,IPTG诱导重组菌表达GST-MIP融合蛋白,PreScission蛋白酶切除GST标签后免疫Balb/c小鼠,ELISA法检测MIP的免疫学特性。结果MIP编码基因正确插入pGEX-6p-1载体,核苷酸序列与GenBank登陆的Ct D型MIP基因完全一致;重组融合蛋白在E.coli中稳定高效表达,酶切后纯度达90%以上;MIP蛋白具有良好的免疫原性,诱导小鼠产生高滴度特异性IgG型抗体,亚型以IgG2a为主;MIP免疫组小鼠脾淋巴细胞受MIP蛋白刺激,分泌高水平IFN-γ。结论重组表达的Ct MIP 蛋白具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生高特异性的体液及细胞免疫应答,可进一步探讨其作为Ct亚单位疫苗的可行性。
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关 键 词: | 沙眼衣原体 MIP 免疫原性 疫苗 |
收稿时间: | 2016/4/1 0:00:00 |
修稿时间: | 2016/10/11 0:00:00 |
Prokaryotic Expression,Purification and Immunological Characters of Microphage Infectivity Potentiator of Chlamydia Trachomatis |
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Abstract: | |
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Keywords: | chlamydial trachomatis MIP immunogenicity vaccine |
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