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GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定
引用本文:陈春莲,彭俊,余敏君,尹卫国,朱翠明,万艳平.GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定[J].南华大学学报(医学版),2007,35(5):643-645.
作者姓名:陈春莲  彭俊  余敏君  尹卫国  朱翠明  万艳平
作者单位:1. 南华大学,病原生物学研究所,湖南,衡阳,421001;桂林医学院,附属医院,内科
2. 南华大学,病原生物学研究所,湖南,衡阳,421001
摘    要:目的 构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础.方法 用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-Cl载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定.结果 阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb、618 bp和243 bp附近的片段.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确.结论 成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD.

关 键 词:人乳头瘤病毒  E2基因  绿色荧光蛋白  真核表达  删除  突变体  融合蛋白  真核表达载体  构建与鉴定  Mutant  Eukaryotic  Expression  Vector  Identification  完全  读码框  移码突变  碱基错配  基因片段  重组质粒  显示  分析  BLAST  序列  GenBank  测序鉴定
文章编号:1672-7444(2007)05-0643-03
收稿时间:2007-03-11
修稿时间:2007年3月11日

Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector for Mutant of HPV 18 E2 Fused with GFP
CHEN Chun - lian,PENG Jun,YU Min - jun,et al.Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector for Mutant of HPV 18 E2 Fused with GFP[J].Journal of Nanhua University(Medical Edition),2007,35(5):643-645.
Authors:CHEN Chun - lian  PENG Jun  YU Min - jun  
Abstract:
Keywords:HPV  E2 gene  GFP  eukaryotic expression
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