肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1和前胶原基因的表达

急性肺泡炎是肺纤维化病变基础，在肺泡炎形成过程中涉及炎性细胞、免疫效应细胞和细胞因子。体外试验证明肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1（TGF-β1）可上调人胚肺成纤维细胞前胶原mRNA的表达［1，2］,提示急性肺泡炎时这些细胞因子与肺纤维化发生有一定的因果关系。我们用博莱霉素A5诱发大鼠肺纤维化，并制成动物模型,对大鼠肺组织中TGF-β1,前胶原Ⅰ和前胶原 Ⅲ的mRNA进行观察，以探讨它们与大鼠肺纤维化的关系。 　　一、材料与方法 　　1. 动物与动物模型: 25只 Wistar雄性大鼠，体重140～170 g，购自中国医学科学院动物中心。将大鼠随机分为5组,每组5只。以乙醚麻醉大鼠，其中1组为正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水；其余各组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 5 mg/kg，博莱霉素3 d组,7 d组,14 d组,30 d组。于灌注后3、7、14、30 d处死大鼠，取右侧肺液氮速冻待检，左侧肺于100 g/L的中性甲醛液中固定，HE染色。 　　2.分子杂交及材料来源：分子杂交按参考文献［3］介绍的方法进行。cDNA 探针片段由北京阜外心血管病医院杨方博士惠赠，此片段是由含编码人的前胶原Ⅰ和前胶原Ⅲ重组质粒菌种PH CAL1 TU，PHFS3 中提取的；TGF-β1 cDNA片段由北京市肿瘤研究所高崇峰提供，β-肌动蛋白（β-actin）cDNA 片段购自中山生物技术公司。