慢性特发性血小板减少性紫癜相关T细胞克隆的T细胞受体特征

目的研究与特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病相关的反应性T细胞克隆的T细胞受体13链可变区（TCRBV）基因特征。方法应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）扩增25例ITP患者和20名正常人外周血以及20例脐带血的TCRBV24个家族的基因序列,在长泳道测序胶上电泳,形成TCRBV互补决定区3（CDR3）基因表达谱型图。通过谱型图上电泳条带分析TCRBV基因分布特征,切割代表性条带测序。结合临床特点进行分析。结果（1）急性ITP（aITP）和慢性ITP（cITP）的TCRBV CDR3基因表达谱型图有明显不同,15例aITP浓集条带与正常对照组相比,差异无统计学意义（P=0．179）。10例cITP则都出现以一些浓集条带为代表的寡克隆T细胞增生,浓集条带明显多于正常对照组（P〈0．05）。其中6例cITP在TCRBV8亚家族分别出现1～2条浓集条带,共8条浓集条带,3例cITP在TCRBV 13．1亚家族各出现1条浓集条带,4例cITP在TCRBV 14亚家族出现5条浓集条带,3例cITP在TCRBV17亚家族出现4条浓集条带。将这20个浓集条带直接测序,有19个条带测序为单克隆T细胞扩增,1条BV14条带测序呈多克隆性。（2）比较10例cITP患者T细胞克隆的TCRBV基因或者编码CDR3的氨基酸,其中2例患者的TCRBV8全部基因序列相同,另有3例患者的TCRBV13．1全部基因序列相同。4例cITP患者中有2例的T细胞克隆TCRBV17的CDR3完全一致,全部序列仅仅框架区4有3个氨基酸不同,另有2例的T细胞克隆的TCRBV17的CDR3序列仅有4个氨基酸不同,表明不同cITP患者有同样或者功能类似的TCRBV基因编码的T细胞克隆增殖。不同患者分属不同TCRBV基因家族的19个T细胞克隆的CDR3区共用3种模体,有7个T细胞克隆的TCRBV CDR3共用模体E（D）TQYFGPG;4个T细胞克隆的TCRBV CDR3共用模体N（K）EQFFGPG;4个TCRBV17的T细胞克隆中有3个T细胞克隆的TCRBV17 CDR3共用模体GANVLTTGAG。结论cITP发病与特定的T细胞寡克隆扩增有关,这些T细胞克隆的CDR3共享3种可能结合同样抗原的模体。aITP没有明显的T细胞克隆变化。

T cell repertoires correlate with pathogenesis of chronic idiopathic thrombocytopenic purpura