复方肾怡治疗狼疮肾炎小鼠的疗效及对补体旁路途径激活的研究

背景 狼疮肾炎（LN）是系统性红斑狼疮严重并发症之一，相关研究表明中药复方肾怡（SY）可以调节机体免疫及抑制肾脏纤维化。目前运用复方SY治疗LN的疗效及机制尚不清楚。 目的 探究复方SY对LN小鼠的治疗作用及补体旁路途径激活的影响。 方法 2021年4—7月，选取35只SPF级MRL/lpr小鼠（8周龄）、6只SPF级C57BL/6J小鼠（8周龄）进行实验。将MRL/lpr小鼠依据随机数字表法分为MRL/lpr组（n=8）及SY低剂量组（n=9）、SY中剂量组（n=9）、SY高剂量组（n=9），C57BL/6J小鼠为正常对照组（n=6）。SY低、中、高剂量组分别以15.34、46.02、92.04 g/kg剂量进行复方SY汤剂灌胃，正常对照组及MRL/lpr组以0.5 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃。从小鼠12周龄开始干预，1次/d，持续14周。观察各组动物体征，检测尿蛋白与肌酐比值（UPCR），血清抗双链DNA抗体（anti-dsDNA）、抗核抗体（ANA）水平，肾脏组织病理情况，肾脏组织C3、免疫球蛋白G（IgG）、C5b-9免疫沉积情况，肾脏组织α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）、Fibronectin及补体蛋白水平。 结果 截至干预结束，正常对照组6只小鼠存活，MRL/lpr组3只小鼠存活，SY低、中、高剂量组分别有5、7、9只小鼠存活。（1）正常对照组、SY中剂量组、SY高剂量组小鼠体征量化分值均低于MRL/lpr组（P<0.05）。（2）正常对照组、SY各剂量组小鼠干预第9、10、11、12、13周UPCR均低于MRL/lpr组（P<0.05）。（3）正常对照组、SY低剂量组、SY高剂量组小鼠干预14周后血清anti-dsDNA水平低于MRL/lpr组（P<0.05）；正常对照组、SY各剂量组小鼠干预14周后血清ANA水平低于MRL/lpr组（P<0.05）。（4）干预14周后，HE染色可见MRL/lpr组小鼠肾小球内有免疫复合物沉积，PAS染色可见肾小球内有新月体形成；HE染色可见SY各剂量组小鼠肾小球大致正常，而PAS染色可见SY中、高剂量组小鼠肾小球内有系膜细胞增生，伴少量炎细胞浸润。（5）正常对照组、SY各剂量组小鼠干预14周后肾脏组织C3、C5b-9沉积低于MRL/lpr组（P<0.05）；SY低剂量组、SY高剂量组小鼠干预14周后肾脏组织IgG免疫沉积低于MRL/lpr组（P<0.05）。（6）SY高剂量组小鼠干预14周后肾脏组织CollagenⅠ、Fibronectin 、C3、C5、CD35蛋白水平低于MRL/lpr组（P<0.05）；SY低、中剂量组小鼠干预14周后肾脏组织Fibronectin、C3、C5、CD35蛋白水平低于MRL/lpr组（P<0.05）；正常对照组小鼠干预14周后肾脏组织Fibronectin蛋白水平低于MRL/lpr组（P<0.05）。 结论 复方SY可改善MRL/lpr小鼠狼疮肾脏损伤，延缓疾病进展，其作用机制可能是通过抑制补体旁路途径的激活。

Chinese Herbal Formula Shenyi Improves Kidney Injury and Inhibits the Activation of the Alternative Complement Pathway in a Mouse Model of Lupus Nephritis