| 肺癌细胞抑制CD4+T细胞 IFN-γ基因表达的机制研究 |
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| 引用本文： | 秦雪君,潘世扬,王 芳,彭 蘡,徐 娟,韩 月,孙瑞红,张丽霞,王 宏,谢而付,高 丽,庞智睿.肺癌细胞抑制CD4+T细胞 IFN-γ基因表达的机制研究[J].南京医科大学学报,2012(5):659-663. |
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| 作者姓名： | 秦雪君 潘世扬 王 芳 彭 蘡 徐 娟 韩 月 孙瑞红 张丽霞 王 宏 谢而付 高 丽 庞智睿 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院检验学部,国家临床检验重点专科建设单位,江苏 南京 210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30972821,30901344, 30901262),江苏省实验诊断学重点实验室基金(XK201114) |
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| 摘 要： | 目的:研究肺癌细胞能否直接影响CD4+T 细胞干扰素-γ(IFN-γ)基因启动子甲基化水平?方法:ELISA法检测肺癌组(n = 30)及健康对照组(n = 30)血浆IFN-γ水平;免疫磁珠分选两组外周血CD4+T 细胞(n = 8),提取DNA后经亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增 IFN-γ基因启动子进行TA克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析;建立健康人CD4+T 细胞与肺腺癌细胞株SPC-A1体外Transwell共培养体系(n = 6),并设健康人CD4+T 细胞单独培养为对照组,培养5 d后分别收集CD4+T 细胞?CD4+T 细胞按上述法进行TA克隆测序?同时CD4+T 细胞经anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,ELISA法检测两组上清IFN-γ表达水平,RT-PCR检测CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平?结果:肺癌组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组(69.30 ± 38.56) pg/ml vs (92.62 ± 34.75) pg/ml,P = 0.017];肺癌组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于健康对照组(84.6% vs 68.6%,P < 0.001);肺癌患者血浆IFN-γ水平与其基因启动子甲基化率呈负相关(r = -0.850 3,P = 0.010 7)?体外Transwell共培养实验中,与对照组相比,实验组CD4+T 细胞anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,IFN-γ表达水平显著下降6 h:(14.53 ± 7.12) pg/ml vs (36.14 ± 23.51) pg/ml,24 h:(7.81 ± 4.02) pg/ml vs (24.85 ± 15.58) pg/ml],6 h对照组CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平为实验组的2.37倍?实验组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于对照组(85.4% vs 70.9%)?结论:肺癌细胞可诱导CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子发生高甲基化,进而导致IFN-γ基因表达下调,可能对肺癌患者的免疫抑制起重要作用?
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| 关 键 词： | DNA甲基化 干扰素-γ CD4+T 细胞 肺癌细胞 |
| 收稿时间： | 2011/12/22 0:00:00 |
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