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体外高效扩增人外周血调节性T细胞技术的建立
引用本文:王 星,吴 倩,王悦舒,张玲玉,秦 瑶,许馨予,张 梅.体外高效扩增人外周血调节性T细胞技术的建立[J].南京医科大学学报,2018(8):1034-1038.
作者姓名:王 星  吴 倩  王悦舒  张玲玉  秦 瑶  许馨予  张 梅
作者单位:南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029
基金项目:国家自然科学基金(81070622,81370939,81670756,81530026);江苏省“333高层次人才培养工程”(2016-7)
摘    要:目的:建立一种调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)体外高效扩增技术。方法:流式细胞仪分选健康人外周血CD4+CD25+CD127low T细胞,CD3/CD28磁珠刺激联合高浓度白介素?2(interleukin 2,IL?2)培养14 d。通过细胞计数评估Tregs体外扩增能力,采用流式细胞仪鉴定扩增Tregs的表型,采用混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)实验检测Tregs的抑制功能。结果:CD4+CD25+CD127low T细胞培养14 d后增殖(755.5 ± 213.5)倍。流式细胞鉴定扩增后的细胞:CD4分子表达为(98.3 ± 1.04)%,CD19分子表达为(0.039 ± 0.021)%,CD8分子表达为(0.443 ± 0.239)%,CD25分子表达为(97.6 ± 1.35)%。FOXP3分子表达为(87.7 ± 5.5)%,Helios分子表达为(73.3 ± 2.9)%。MLR实验显示:Tregs以不同比例与外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)共培养,当Tregs∶PBMC为1∶1时,PBMC增殖抑制率最高,为(84.39 ± 1.98)%。结论:成功建立一种体外高效扩增Tregs技术。扩增后细胞保留原有的细胞表型,并具备免疫抑制功能,为临床运用Tregs治疗自身免疫性疾病、抑制移植排斥反应提供了广阔的应用前景。

关 键 词:调节性T细胞  体外扩增  表型  功能  
收稿时间:2018/3/13 0:00:00

Establishing a method for expansion of human regulatory T cells with high efficiency in vitro
Wang Xing,Wu Qian,Wang Yueshu,Zhang Lingyu,Qin Yao,Xu Xinyu and Zhang Mei.Establishing a method for expansion of human regulatory T cells with high efficiency in vitro[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2018(8):1034-1038.
Authors:Wang Xing  Wu Qian  Wang Yueshu  Zhang Lingyu  Qin Yao  Xu Xinyu and Zhang Mei
Abstract:
Keywords:
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