| 肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定 |
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| 引用本文： | 徐璐,朱进,仇镇宁,李玉华,张建平,孙景军,丁贵鹏,王子露,冯振卿,管晓虹.肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定[J].南京医科大学学报,2005,25(7):476-479,488,F003. |
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| 作者姓名： | 徐璐 朱进 仇镇宁 李玉华 张建平 孙景军 丁贵鹏 王子露 冯振卿 管晓虹 |
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| 作者单位： | [1]南京医科大学病理学系，南京210029 [2]南京医科大学医学分子生物学研究所，南京210029 [3]南京医科大学第二附属医院普外科，南京210011 |
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| 基金项目： | 江苏省卫生厅科学基金资助项目(H200103) |
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| 摘 要： | 目的：扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE—A9(melanoma antigen A9)cDNA，构建原核表达载体，制备抗MAGE—A9单抗．观察其在肝细胞癌中的表达。方法：从人肝癌组织提取总RNA，用RT—PCR从中扩增出MAGE—A9 cDNA，插入载体pMD18-T中．测序正确后，构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE—A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达。重组蛋白经L-Arabinose诱导表达纯化后．制备抗MAGE—A9单抗．免疫组化检测MAGE—A9在肝细胞癌中的表达和定位。结果：获得MAGE-A9cDNA，测序结果与GenBank一致。成功构建表达载体，表达可溶重组蛋白，SDS—PAGE分析其相对分子质量为35kD。获得抗MAGE—A9单抗，MAGE-A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21％(8／39)，主要表达于胞浆，未见肿瘤异质性，统计学分析MAGE—A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性。结论：有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE—A9抗原，且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性．MAGE-A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点。
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| 关 键 词： | 黑色素瘤抗原 MAGE—A9 RT-PCR 基因克隆 基因表达 |
| 文章编号： | 1007-4368(2005)07-0476-05 |
Cloning,expression and characteristics determination of human melanoma antigen MAGE-A9 |
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| XU Lu,ZHU Jin,QIU Zhen-ning,LI Yu-hua,ZHANG Jian-ping,SUN Jing-jun,DING Gui-peng,WANG Zi-lu,FENG Zhen-qing,GUAN Xiao-hong.Cloning,expression and characteristics determination of human melanoma antigen MAGE-A9[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2005,25(7):476-479,488,F003. |
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| Authors: | XU Lu ZHU Jin QIU Zhen-ning LI Yu-hua ZHANG Jian-ping SUN Jing-jun DING Gui-peng WANG Zi-lu FENG Zhen-qing GUAN Xiao-hong |
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| Institution: | XU Lu,ZHU Jin1,QIU Zhen-ning1,LI Yu-hua,ZHANG Jian-ping2,SUN Jing-jun,DING Gui-peng,WANG Zi-lu,FENG Zhen-qing*,GUAN Xiao-hong1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | melanoma antigen MAGE-A9 RT-PCR gene cloning gene expression |
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