| miR-146a前体多态性对宫颈癌细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 胡启明,丁 波,崔毓桂,周德兰,梁佳乐,韩男男,韩素萍.miR-146a前体多态性对宫颈癌细胞增殖的影响[J].南京医科大学学报,2016(6):676-681. |
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| 作者姓名： | 胡启明 丁 波 崔毓桂 周德兰 梁佳乐 韩男男 韩素萍 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院妇产科,江苏 南京 210036,东南大学附属中大医院妇产科,江苏 南京 210009,南京医科大学第一附属医院妇产科,江苏 南京 210036,南京医科大学第一附属医院妇产科,江苏 南京 210036,南京医科大学第一附属医院妇产科,江苏 南京 210037,南京医科大学第一附属医院妇产科,江苏 南京 210038,南京医科大学第一附属医院妇产科,江苏 南京 210039 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅基础研究计划(自然科学基金)(BK2012878) |
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| 摘 要： | 目的:通过转染miR-146a前体(Pre-miR-146a)多态性真核表达质粒,观察miR-146a多态性对miR-146a表达情况和宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响并探讨可能的作用机制?方法:PCR扩增含多态性位点的Pre-miR-146a目的片段,连接入pcDNA3.1(+)质粒表达载体得到Pre-miR-146a-G及Pre-miR-146a-C重组质粒,将重组质粒转染宫颈癌HeLa细胞?实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测miR-146a的表达,CCK8法检测HeLa细胞的增殖情况,real-time PCR以及Western blot检测miR-146a靶基因肿瘤坏死因子受体相关激酶-6(TNF receptor-associated factor 6,TRAF6)的表达?结果:成功将miR-146a多态性前体片段克隆入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,获得Pre-miR-146a-G及Pre-miR-146a-C重组质粒;转染重组质粒能够在HeLa细胞内高效和特异地表达miR-146a(P < 0.05),且转染Pre-miR-146a-C质粒组miR-146a表达量较Pre-miR-146a-G质粒组高,差异有统计学意义(P < 0.05);HeLa细胞转染重组质粒48 h后,其细胞存活率较对照组显著增加(P < 0.05),细胞内TRAF6的蛋白水平显著下降(P < 0.05),但TRAF6的mRNA水平无变化,差异无统计学意义(P > 0.05)?结论:Pre-miR-146a多态性位点能影响成熟miR-146a表达,过表达miR-146a可能通过下调TRAF6基因抑制NF-κB信号通路,从而促进HeLa细胞增殖?
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| 关 键 词： | 宫颈癌 真核表达载体 miR-146a 细胞增殖 肿瘤坏死因子受体相关激酶-6 |
| 收稿时间： | 2015/9/22 0:00:00 |
Polymorphism effect of Pre-miR-146a on the proliferation of cervical cancer cells |
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| Hu Qiming,Ding Bo,Cui Yugui,Zhou Delan,Liang Jiale,Han Nannan and Han Suping.Polymorphism effect of Pre-miR-146a on the proliferation of cervical cancer cells[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2016(6):676-681. |
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| Authors: | Hu Qiming Ding Bo Cui Yugui Zhou Delan Liang Jiale Han Nannan and Han Suping |
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| Institution: | Department of Obstetrics & Gynecology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210036,Department of Obstetrics and Gynecology,Affiliated Zhongda Hospital of Southe ast University,Nanjing 210009,China,Department of Obstetrics & Gynecology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210036,Department of Obstetrics & Gynecology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210036,Department of Obstetrics & Gynecology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210036,Department of Obstetrics & Gynecology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210036 and Department of Obstetrics & Gynecology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210036 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cervical cancer eukaryotic expression plasmid miR-146a cell proliferation TNF receptor-associated factor 6 |
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