| 人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1特异性基因工程抗体Fab的筛选与特性 |
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| 引用本文： | 毛 圆,张大为,曹 清,唐小军,林 红,陈仁杰,徐凛峰,冯振卿.人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1特异性基因工程抗体Fab的筛选与特性[J].南京医科大学学报,2012(12):1646-1651. |
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| 作者姓名： | 毛 圆 张大为 曹 清 唐小军 林 红 陈仁杰 徐凛峰 冯振卿 |
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| 作者单位： | 江苏省省级机关医院耳鼻咽喉-头颈外科,江苏 南京 210009;南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉-头颈外科,江苏 南京 210011;南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉-头颈外科,江苏 南京 210011;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;江苏省血液中心,江苏 南京 210042;南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉-头颈外科,江苏 南京 210011;南京医科大学第二附属医院普外科,江苏 南京 210011;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅社会发展支撑计划项目(BE 2009152),南京医科大学青年基金资助项目(QN201004) |
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| 摘 要： | 目的:应用噬菌体展示技术制备抗EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latert membrare protern 1,LMP1)特异性?高亲和力的全人抗体Fab片段?方法:利用稳定转染表达LMP1的SUNE-1细胞及原核表达的LMP1胞外区蛋白作为抗原对大容量人源Fab抗体库进行差减筛选及固相筛选,经过5轮细胞筛选和3轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用LMP1阳性表达的人鼻咽癌细胞株HNE2/LMP1鉴定抗LMP1抗体Fab的结合活性?结果:Western blot?免疫荧光结果显示,从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗LMP1抗体Fab,细胞ELISA?荧光激活细胞分类术?免疫荧光分析?免疫组化检测结果显示Fab与人鼻咽癌细胞表面LMP1分子有较好的结合活性?结论:从人源Fab抗体库中筛选的Fab抗体能够与鼻咽癌细胞表面LMP1分子特异性结合,为研制用于EBV相关肿瘤如鼻咽癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子?
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| 关 键 词： | 噬菌体抗体库 EB病毒 潜伏膜蛋白1 抗原结合片段 靶向治疗 |
| 收稿时间： | 2012/5/12 0:00:00 |
Selection and characterization of anti-EBV-LMP1 humanized genetic engineering antibody Fab |
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| MAO Yuan,ZHANG Da-wei,CAO Qing,TANG Xiao-jun,LIN Hong,CHEN Ren-jie,XU Lin-feng and FENG Zhen-qing.Selection and characterization of anti-EBV-LMP1 humanized genetic engineering antibody Fab[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2012(12):1646-1651. |
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| Authors: | MAO Yuan ZHANG Da-wei CAO Qing TANG Xiao-jun LIN Hong CHEN Ren-jie XU Lin-feng and FENG Zhen-qing |
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| Institution: | Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,Jiangu Province Official Hospital,Nanjing 210009;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011;Jiangsu Province Blood Center,Nanjing 210042;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011;Department of General Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011,China;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phage antibody library EBV LMP1 Fab targeted therapy |
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