| HIV-I编码病毒蛋白R基因在真核细胞中的表达及其表达蛋白对KSHV溶解性周期复制的影响 |
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| 引用本文： | 方 欣,卢 春,曹 戌,李久明,秦 娣,吕志刚.HIV-I编码病毒蛋白R基因在真核细胞中的表达及其表达蛋白对KSHV溶解性周期复制的影响[J].南京医科大学学报,2008,28(9):1089-1094. |
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| 作者姓名： | 方 欣 卢 春 曹 戌 李久明 秦 娣 吕志刚 |
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| 作者单位： | 南京医科大学微生物学与免疫学系 |
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| 摘 要： | 目的:构建含人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)编码病毒蛋白R(Vpr)基因的重组真核表达质粒并初步探索Vpr基因编码蛋白对卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)溶解性周期复制的影响.方法:构建pVpr-Flag重组质粒并进行酶切鉴定和序列测定;将pVpr-Flag重组质粒临时转染BCBL-1和NIH3T3细胞,采用RT-PCR、IFA和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测Vpr基因的表达情况:提取临时转染pVpr-Flag重组质粒的BCBL-1细胞总RNA,进行RT-PCR检测KSHV次要衣壳蛋白编码基因ORF26(仅在病毒裂解期表达)mRNA转录水平,初步探索HIV-1 Vpr基因编码蛋白对KSHV复制的影响.结果:克隆的Vpr基因序列与GenBank中已登记的Vpr序列100%同源.RT-PCR、IFA和Western blot结果显示Vpr基因mRNA及其编码蛋白在真核细胞中得到了转录和表达.RT-PCR结果进一步显示,Vpr基因编码蛋白能够降低KSHVORF26mRNA转录水平.结论:成功构建含Vpr基因序列的重组质粒并在真核细胞中获得正确表达:初步探索表明Vpr蛋白能够抑制KSHV溶解性周期复制.
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| 关 键 词： | 人类免疫缺陷病毒1型 病毒蛋白R 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 真核表达 复制 |
| 收稿时间： | 2008/4/19 0:00:00 |
The eukaryotic expression of HIV-1 encoded viral protein regulatory gene and its effect on the lytic cycle replication of KSHV |
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| FANG Xin,LU Chun,CAO Xu,LI Jiu-ming,QIN Di and LV Zhi-gang.The eukaryotic expression of HIV-1 encoded viral protein regulatory gene and its effect on the lytic cycle replication of KSHV[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2008,28(9):1089-1094. |
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| Authors: | FANG Xin LU Chun CAO Xu LI Jiu-ming QIN Di and LV Zhi-gang |
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| Institution: | Department of Microbiology and Immunology,NJMU,Nanjing 210029,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human immunodeficiency virus-1 viral protein regulatory KSHV eukaryotic expression replication |
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