| 一种新的HBV DNA rtA181T耐药突变检测方法 |
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| 引用本文： | 陈洪涛,何桂蓉,吴诗品.一种新的HBV DNA rtA181T耐药突变检测方法[J].南京医科大学学报,2016(7):880-885. |
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| 作者姓名： | 陈洪涛 何桂蓉 吴诗品 |
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| 作者单位： | 暨南大学医学院附属第二临床医学院感染内科,广东 深圳 518020,暨南大学医学院附属第二临床医学院检验科,广东 深圳 51802,暨南大学医学院附属第二临床医学院感染内科,广东 深圳 518020 |
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| 基金项目： | 广东省药学会肝炎用药研究基金(2012G24) |
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| 摘 要： | 目的:通过巢式PCR及特异引物,建立一种新的乙肝病毒(HBV) DNA rtA181T耐药突变的PCR直接扩增检测方法?方法:巢式PCR方法第1轮扩增HBV DNA 逆转录酶rt活性域片段,第2轮PCR上游引物3′末端碱基设计为与HBV DNA rtA181T突变碱基相同的碱基,扩增出的目的基因片段,即为突变片段?利用该方法,本文检测了43例HBV DNA rtA181T变异标本,分析该方法检测的灵敏性;并比较分析低拷贝HBV DNA水平与高拷贝HBV DNA水平下,该方法与PCR-Sanger测序法检测HBV DNA rtA181T突变的一致性?结果:产物经测序证实,突变检测引物巢式PCR法能扩增出HBV DNA rtA181T耐药突变?在HBV DNA水平为24 U/?滋L?rtA181T突变株含量低至10%时,该方法仍能较好检测出rtA181T变异片段?对43例不同拷贝水平的HBV DNA rtA181T耐药变异临床标本检测显示,该方法检测灵敏性达100%,常规PCR-Sanger测序灵敏性为74%,差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:基于巢式PCR及突变引物为基础的HBV DNA rtA181T耐药突变PCR直接检测法能较好地检测HBV DNA rtA181T耐药变异发生;对HBV DNA低拷贝水平下的rtA181T耐药变异检测,该方法灵敏性优于Sanger测序法,且有较好的特异性?这对早期发现HBV DNA耐药突变?及时更改抗HBV治疗策略具有重要临床指导意义?
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 耐药性 突变 基因测定 |
| 收稿时间： | 2015/8/20 0:00:00 |
A new method to detect drug-resistant mutation of HBV DNA rtA181T |
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| Chen Hongtao,He Guirong and Wu Shiping.A new method to detect drug-resistant mutation of HBV DNA rtA181T[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2016(7):880-885. |
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| Authors: | Chen Hongtao He Guirong and Wu Shiping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis B virus drug resistance mutation genetic testing |
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