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大容量天然人源Fab抗体库的构建及日本血吸虫抗独特型抗体的筛选、鉴定
引用本文:张慧林,焦永军,朱进,冯振卿,管晓虹.大容量天然人源Fab抗体库的构建及日本血吸虫抗独特型抗体的筛选、鉴定[J].南京医科大学学报,2006,26(9):737-740.
作者姓名:张慧林  焦永军  朱进  冯振卿  管晓虹
作者单位:南京医科大学病理学系,南京医科大学病理学系,南京医科大学病理学系,南京医科大学病理学系,南京医科大学病理学系 江苏南京210029,卫生部抗体技术重点实验室,江苏南京210029,江苏南京210029,江苏南京210029,江苏南京210029,江苏南京210029,卫生部抗体技术重点实验室,江苏南京210029
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:目的:构建大容量天然人源Fab抗体库,筛选全人源日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定。方法:采集15位健康成人的骨髓淋巴细胞,构建天然人源Fab抗体库。并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达。结果:构建了2×109大容量天然人源Fab抗体库,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。经过6轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取80个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(C12、C19、D1、D2),其中C12经SDS-PAGE电泳显示插入片断正确。结论:成功构建了大容量天然人源Fab抗体库,并从中获得人源日本血吸虫抗独特型抗体C12,为研制用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础。

关 键 词:日本血吸虫  噬菌体抗体库  抗独特型抗体  抗体Fab段
文章编号:1007-4368(2006)09-0737-04
收稿时间:2006-03-13
修稿时间:2006年3月13日

Screening and identification of human Fab antibody against idiotypic antibody of schistosoma japonicum from large naive phage-display library
ZHANG Hui-lin,JIAO Yong-jun,ZHU Jin,FENG Zhen-qing,GUAN Xiao-hong.Screening and identification of human Fab antibody against idiotypic antibody of schistosoma japonicum from large naive phage-display library[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2006,26(9):737-740.
Authors:ZHANG Hui-lin  JIAO Yong-jun  ZHU Jin  FENG Zhen-qing  GUAN Xiao-hong
Abstract:
Keywords:schistosoma japonicum  phage library  anti-idiotypic antibody  Fab
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