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人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:张玲,卢春,曾怡,钱超,唐桂霞,秦娣.人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体的制备与鉴定[J].南京医科大学学报,2005,25(10):685-688,F0002.
作者姓名:张玲  卢春  曾怡  钱超  唐桂霞  秦娣
作者单位:南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏南京 210029
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30100160/30271179)
摘    要:目的:制备人类疱疹病毒8型(HHV-8)包膜糖蛋白K8.1的单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:用异丙基硫代一β—D一半乳糖苷(IPTG)诱导含重组质粒pGEX-6p-1 +K8.1的大肠杆菌BL21表达符胱甘肽-S-转移酶GST/K8.1融合蛋白,将以包涵体形式存在的融合蛋白进行变性、复性、复性后的Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化。以纯化的GST/K8.1融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠.常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选分泌K8.1单抗的杂交瘤细胞株。免疫组化染色(IHC)和Western blot法鉴定单抗的特异性。结果:建立了一株稳定分泌抗K8.1单抗的杂交瘤细胞株.命名为3G10:IHC和Westerfl blot法显示.3G10株单抗能特异地识别HHV-8K8.1蛋白。结论:成功制备出抗HHV-8包膜糖蛋白K8.1的单克隆抗体。

关 键 词:人类疱疹病毒8型  包膜糖蛋门K8.1  包涵体  单克隆抗体
文章编号:1007-4368(2005)10-0685-04
收稿时间:2005-04-30
修稿时间:2005-04-30

Generation and identification of monoclonal antibodies against the envelope glycoprotein K8.1 of human herpesvirus 8
ZHANG Ling, LU Chun,ZENG Yi, QIAN Chao,TANG Gui-xia,QIN Di.Generation and identification of monoclonal antibodies against the envelope glycoprotein K8.1 of human herpesvirus 8[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2005,25(10):685-688,F0002.
Authors:ZHANG Ling  LU Chun  ZENG Yi  QIAN Chao  TANG Gui-xia  QIN Di
Institution:Department of Microbiology and Immunology, NJMU, Nanjing 210029, China
Abstract:
Keywords:human herpesvirus 8  envelope glycoprotein K8  1  inclusion body  monoclonal antibody
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