| EB病毒潜伏膜蛋白2A胞外区重组基因在大肠杆菌中的表达及其在血清学检测中的应用 |
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| 引用本文： | 许文嵘,姚 堃,陈 云,尹全章,徐 建,周 锋.EB病毒潜伏膜蛋白2A胞外区重组基因在大肠杆菌中的表达及其在血清学检测中的应用[J].南京医科大学学报,2007,27(3):209-212. |
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| 作者姓名： | 许文嵘 姚 堃 陈 云 尹全章 徐 建 周 锋 |
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| 作者单位： | 南京医科大学微生物与免疫学系,江苏南京210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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江苏省科技攻关项目
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江苏省卫生厅科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)胞外区重组基因的表达载体在大肠杆菌中表达,并将表达的蛋白用于EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者的血清学检测.方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP2A胞外区重组基因的质粒pEC2A双酶切后,克隆到pET32a中.重组质粒经PCR、酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌(E.coli)BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化,并用Western blot法检测其抗原活性.用纯化的蛋白进行鼻咽癌患者血清学检测.结果:重组表达质粒经PCR及酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确.SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为40 ku.以此为抗原能在鼻咽癌患者血清中检测到特异性的抗体.结论:成功获得了LMP2A胞外区重组基因表达的蛋白,纯化的蛋白可用于EBV相关鼻咽癌患者的血清学检测.
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| 关 键 词： | EB病毒 LMP2A 重组基因 表达 血清学检测 病毒 潜伏膜蛋白 胞外区 重组基因表达 大肠杆菌 血清学检测 应用 detection application escherichia coli virus gene recombinant 抗体 患者血清 抗原活性 分子质量 重组蛋白 显示 阳性 |
| 文章编号： | 1007-4368（2007）03-0209-04 |
| 收稿时间： | 2006/9/11 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2006-09-11 |
Expression of the recombinant extracellular gene of LMP2A of Epstein-Barr virus in escherichia coli and its application in serological detection |
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| XU Wen-rong,YAO Kun,CHEN Yun,YIN Quan-zhang,XU Jian and ZHOU Feng.Expression of the recombinant extracellular gene of LMP2A of Epstein-Barr virus in escherichia coli and its application in serological detection[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2007,27(3):209-212. |
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| Authors: | XU Wen-rong YAO Kun CHEN Yun YIN Quan-zhang XU Jian and ZHOU Feng |
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| Institution: | Department of Microbiology and Immunology, NJMU, Nanjing 210029, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Epstein-Barr virus LMP2A recombinant gene expression serological detection |
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