S1PR2在非酒精性脂肪性肝炎中的作用初探

目的：探讨1?磷酸?鞘氨醇受体2（sphingosine?1?phosphate receptor 2，S1PR2）、前蛋白转化酶枯草溶菌素9（proprotein convertase subtilisin/kexin type 9，PCSK9）对非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）肝脏损伤可能的调控机制。方法：将12只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组，对照组给予普通饮食，实验组给予蛋氨酸?胆碱缺乏饮食（methio?nine choline deficiency diet，MCD），MCD 6周建立NASH模型。6周末ELISA检测血清和肝脏生化指标丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷氨酰转移酶（glutamyl transferase，GGT）及炎症因子肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF?α）、白细胞介素6（interleukin?6，IL?6）、γ?干扰素（interferon?γ，IFN?γ）的水平；HE 染色、油红O染色和天狼星红染色分别观察肝脏炎症、脂质沉积和纤维化情况。小鼠原代肝细胞和HepG2细胞分别予棕榈酸和/或JTE?013（S1PR2 特异性抑制剂）处理，油红O染色观察肝细胞内脂质沉积情况，蛋白免疫印迹实验检测S1PR2、PCSK9和低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein cholesterol receptor，LDLR）的蛋白表达。构建S1PR2干扰、过表达质粒，分别转染HepG2细胞，进行转录组测序寻找 S1PR2 潜在关联基因，并在NASH造模小鼠中检测筛选出的基因的表达情况。结果：喂养6周后实验组小鼠较对照组肝组织S1PR2表达减少、PCSK9表达增加；使用JTE?013可加重小鼠肝原代细胞和HepG2细胞内脂质沉积，使ERK磷酸化增加，PCSK9表达升高、LDLR降低；S1PR2干扰、过表达质粒分别转染的HepG2细胞中，共有343种基因发生改变，其中早期生长反应蛋白1（early growth response protein 1，Egr1）在S1PR2过表达时增加、干扰时降低，并在NASH模型小鼠中表达减少。结论：S1PR2参与NASH的脂质沉积和炎症损伤过程，这可能与炎症状态下S1PR2被抑制后促进PCSK9表达，降低LDLR表达有关。

Preliminary study on S1PR2 in nonalcoholic steatohepatitis