食管鳞癌中转录因子IRF4对miR-133b表达的调控作用研究 |
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引用本文: | 曾薇,刘翼,李文婷,朱金峰.食管鳞癌中转录因子IRF4对miR-133b表达的调控作用研究[J].中华全科医学,2020,18(11):1815. |
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作者姓名: | 曾薇 刘翼 李文婷 朱金峰 |
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作者单位: | 1. 新疆医科大学附属肿瘤医院肺内科, 新疆 乌鲁木齐 830011; |
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基金项目: | 国家自然科学基金地区科学基金项目(81660397) |
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摘 要: | 目的 食管鳞癌中miR-133b通过调控EGFR/ITGB4/FAK信号通路,发挥抑制肿瘤增殖、侵袭、转移的作用。但目前对于miR-133b的上游调控机制尚不完全清楚,故展开探索。 方法 采用生信分析预测参与调控miR-133b表达的上游转录因子;采用qRT-PCR、Western blotting验证转染IRF4过表达质粒对IRF4和miR-133b在转录和蛋白水平表达的影响;采用染色质免疫共沉淀技术确认IRF4与miR-133b的相互作用;双荧光素酶报告基因实验验证IRF4对miR-133b表达的调控作用机制。 结果 使用ConTra V3预测发现转录因子IRF4能够与miR-133b结合;qRT-PCR、Western blotting实验证实转染IRF4过表达质粒可显著上调IRF4在mRNA(t=-18.950,P=0.010)和蛋白水平的表达(t=-4.061,P=0.042),并促进miR-133b的表达(t=-8.681,P=0.005);染色质免疫共沉淀实验(引物1:t=-17.391,P=0.003;引物2:t=-14.421,P=0.004)和双荧光素酶报告基因实验(t=-22.112,P=0.010)证实转录因子IRF4可直接靶向作用于miR-133b。 结论 验证IRF4对miR-133b的直接靶向调控作用,有助于构建miR-133b的信号调控网络,为食管鳞癌的诊疗提供新靶点。
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关 键 词: | 食管鳞癌 干扰素调节因子4 微小RNA-133b |
收稿时间: | 2020-01-13 |
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