流式细胞术检测细胞周期实验条件的影响因素分析

［摘要］目的: 研究流式细胞术检测细胞周期的各个实验环节对结果的影响。方法: 应用流式细胞术检测经秋水仙素刺激后的人结肠癌细胞株，分析细胞周期的固定方式、细胞数量、固定温度、固定时间以及染色时间等环节对结果的影响。结果： 用PBS吹散后经纯乙醇固定的效果最佳；细胞数太多或太少时，影响检测结果和曲线的平滑程度，且变异系数（coefficient of variation，CV）值增大；固定后放置于常温影响检测结果，置于4℃或-20℃没有显著差异;固定后-20℃放置70 d内检测结果无明显差异；染色完成后2 h内检测结果无明显差异。结论： 1×106细胞沉淀用PBS吹散后经纯乙醇固定，放置于-20 ℃，70 d内检测，染色后2 h之内完成检测。