| 含脂氧素A4受体同源基因真核表达载体的构建与转染系膜细胞 |
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| 引用本文： | 吴升华,陆超,董玲,周国平,陈子庆.含脂氧素A4受体同源基因真核表达载体的构建与转染系膜细胞[J].江苏大学学报(医学版),2005,15(2):93-96. |
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| 作者姓名： | 吴升华 陆超 董玲 周国平 陈子庆 |
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| 作者单位： | 1. 南京医科大学第一附属医院儿科,江苏,南京,210029
2. 南京医科大学第一附属医院中心实验室,江苏,南京,210029 |
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| 基金项目： | 江苏省135医学重点人才工程资助项目(2002-45) |
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| 摘 要： | 目的构建小鼠脂氧素A4受体同源基因(LRHG)的真核表达载体,克隆后转染小鼠肾小球系膜细胞,观察LRHG编码的脂氧素A4受体样蛋白(LRLP)在系膜细胞中的表达.方法应用PCR方法,以小鼠睾丸cDNA为模板,扩增出LRHG基因片段,插入质粒pGEM-T中,转化入大肠杆菌JM109.扩增阳性重组质粒,经酶切后纯化并测序鉴定目的片段.构建含6×组氨酸(His)基因的真核表达载体pcDNA3.1/LRHG-his,转化入大肠杆菌JM109扩增,酶切后再测序鉴定目的片段,抽提质粒后转染系膜细胞,进行Western blot鉴定LRLP的表达.结果测序鉴定表明,克隆的LRHG序列与GenBank中LRHG原序列100%符合,应用抗6×His抗体进行Western blot鉴定系膜细胞中有LR-LP的表达.结论成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/LRHG-his,并转染了肾小球系膜细胞,获得了稳定的表达.
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| 关 键 词： | 脂氧素A4 受体同源基因 真核表达载体 克隆 转染 系膜细胞 |
| 文章编号： | 1671-7783(2005)02-0093-04 |
| 修稿时间： | 2005年1月12日 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector Containing Lipoxin A4 Receptor Homologue Gene and Its Transfection into Mesangial Cells |
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| WU Sheng-hua,LU Chao,DONG Ling,ZHOU Guo-ping,CHEN Zi-qing.Construction of Eukaryotic Expression Vector Containing Lipoxin A4 Receptor Homologue Gene and Its Transfection into Mesangial Cells[J].Journal of Jiangsu University Medicine Edition,2005,15(2):93-96. |
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| Authors: | WU Sheng-hua LU Chao DONG Ling ZHOU Guo-ping CHEN Zi-qing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lipoxin A_4receptor homologue gene Eukaryotic expression vector Clone Transfection Mesangial cells |
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