| 人OX40单克隆抗体的制备、纯化及初步鉴定 |
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| 引用本文： | 崔杰,辛宁,冯永堂,鞠吉雨,王成伟,刘艳菲,苗乃法.人OX40单克隆抗体的制备、纯化及初步鉴定[J].潍坊医学院学报,2010,32(2):81-84. |
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| 作者姓名： | 崔杰 辛宁 冯永堂 鞠吉雨 王成伟 刘艳菲 苗乃法 |
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| 作者单位： | 潍坊医学院免疫学教研室,山东省高校免疫学重点实验室,山东,潍坊,261053 |
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| 摘 要： | 目的 应用杂交瘤技术,制备鼠抗人OX40单克隆抗体.方法 以本室纯化的OX40胞外段融合蛋白免疫6～8周龄的雌性BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞阳性克隆.用杂交瘤细胞接种小鼠腹腔诱生腹水,腹水经饱和硫酸铵纯化沉淀后用间接ELISA法测定抗体的Ig类别.SDS-PAGE分析抗体的纯化程度,用免疫组化技术鉴定单克隆抗体与表达有OX40分子的组织及细胞特异性结合的情况.结果 获得1株能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞,细胞株诱生的小鼠腹水纯化后抗体纯度较高,Ig类别为IgG,蛋白浓度为6.129g/L.制备的单抗经淋巴细胞免疫组化及炎性淋巴组织免疫组化技术初步鉴定结果表明,该抗体与OX40单克隆抗体标准品制剂相比具有类同的特异性.结论 成功获得能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备的单克隆抗体具有较高的纯度和活性.
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| 关 键 词： | 单克隆抗体 杂交瘤 |
The Preparation,Purification and Preliminary Identification of Anti-human OX40 Monoclonal Antibody |
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| CUI Jie,XIN Ning,FENG Yong-tang,JU Ji-yu,WANG Cheng-wei,LIU Yan-fei,MIAO Nai-fa.The Preparation,Purification and Preliminary Identification of Anti-human OX40 Monoclonal Antibody[J].Journal of Weifang Medical College,2010,32(2):81-84. |
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| Authors: | CUI Jie XIN Ning FENG Yong-tang JU Ji-yu WANG Cheng-wei LIU Yan-fei MIAO Nai-fa |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | OX40 |
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