高通量测序检测拉米夫定抗乙肝病毒治疗的耐药突变

目的：建立一种高通量、快速检测拉夫米定耐药突变的新方法，指导临床抗病毒治疗药物的选择。方法：选取 150例慢性乙型肝炎患者血清标本为研究对象，乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）DNA定量结果均阳性（拷贝数≥１03拷贝/ml），设计针对聚合酶P区的扩增引物，经 PCR扩增及磁珠分离，制备焦磷酸测序单链模板，并在 PyroMark ID遗传分析系统上进行焦磷酸测序，检测拉夫米定耐药突变位点。结果：PCR扩增得到 HBV P区产物，焦磷酸测序检测突变频率具有极高的灵敏性、特异性、稳定性的高通量的特征且与拉夫米定用药时间存在相关性。用药时间越长，突变率越高，易出现耐药。结论：新型、高通量焦磷酸测序法用于拉米夫定耐药突变检测，能满足临床批量用药检测及治疗方案设计的需要。

Determination of Lamivudine-resistant mutation against hepatitis B virus via high-throughput sequencing