DHX15在HBV复制中的意义及其机制初步研究

目的：筛选DEx D/H-box家族中可能影响HBV增强子或核心启动子转录活性的基因，初步研究DHX15对HBV复制的调控作用。方法：克隆DEx D/H-box家族基因到表达质粒PCH9，并构建由HBV增强子和核心启动子驱动的海肾荧光素酶报告质粒pcore-Rluc；分别将各种DDX表达质粒与pcore-Rluc共转染HepG2细胞，筛选影响Rluc荧光素酶活性的DDX家族成员。在HepG2细胞中共转染HBV1.3倍体质粒和DHX15表达质粒，通过Western blot检测DHX15在细胞中的表达，用 South－ern blot、Northern blot检测过表达DHX15对细胞中HBV复制水平和转录水平的影响。构建HBV增强子与核心启动子截短突变体，确定DHX15在HBV增强子或核心启动子上的作用区域。结果：成功构建30种DEx D/H-box家族基因克隆；筛选出对HBV增强子/核心启动子有明显影响的基因DHX15（P=0.042）；与对照组相比，过表达DHX15能促进HBV DNA的复制水平；并且能上调HBV RNA转录水平；成功构建HBV核心启动子截短突变体，发现DHX15促进HBV的复制是通过增强子实现的（t=8.292，P=0.001；t=5.215，P=0.006）。结论：过表达DHX15可通过影响HBV增强子的活性从而促进HBV复制。

Effect of DHX15 on the replication of HBV and its mechanism