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BrdU标记人脐带间充质干细胞及对细胞生物学行为影响的体外研究
引用本文:高 黎,祝 华,张 荣,王莉佳,邹 琳,符 州. BrdU标记人脐带间充质干细胞及对细胞生物学行为影响的体外研究[J]. 重庆医科大学学报, 2014, 38(11): 1617-1621
作者姓名:高 黎  祝 华  张 荣  王莉佳  邹 琳  符 州
作者单位:1. 重庆医科大学附属儿童医院发育疾病研究教育部重点实验室,重庆 400014;2. 重庆医科大学附属儿童医院分子生物中心,重庆 400014;3. 重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心,重庆 400014;儿科学重庆市重点实验室、重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地、重庆市干细胞治疗工程研究中心,重庆 400014
摘    要:目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法:将hUC-MSCs分离培养并进行细胞表面标志物及多向分化潜能鉴定,取第5代细胞以终浓度分别为10、15、20、25 ?滋mol/L BrdU进行标记,采用空白BrdU作为对照组,分别培养24、48、72 h及96 h后,台盼蓝排斥实验检测细胞活力;MTT法检测细胞增殖能力;AnnexinV-FITC检测细胞存活率及凋亡率,免疫组化法检测各组标记率。结果:台盼蓝排斥实验检测细胞活力都在96%以上,实验组与对照组比较均无统计学意义(不同浓度组间比较P=0.89,各时间点比较P=0.61,时间与不同浓度的交互作用P=0.89)。MTT结果显示BrdU对细胞增殖无抑制(P >0.05)。不同浓度标记组间细胞增殖率及凋亡率的差异(增殖率F=12.02,P<0.001,凋亡率F=6.14,P=0.009)。结论:BrdU标记hUC-MSCs是安全可靠的,BrdU标记hUC-MSCs的最佳剂量和时间为20 ?滋mol/L、72 h,适于hUC-MSCs在临床前实验研究的体内示踪。

关 键 词:人脐带间充质干细胞;5-溴脱氧尿嘧啶核苷;增殖;凋亡

Effect of 5-bromo-2-deoxyuridine labeled umbilical cord mesenchymal stem cells on cell biology behaviors in vitro
Gao Li,Zhu Hu,Zhang Rong,Wang Liji,Zou Lin,Fu Zhou. Effect of 5-bromo-2-deoxyuridine labeled umbilical cord mesenchymal stem cells on cell biology behaviors in vitro[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2014, 38(11): 1617-1621
Authors:Gao Li  Zhu Hu  Zhang Rong  Wang Liji  Zou Lin  Fu Zhou
Abstract:
Keywords:
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