| 应用AdEasy腺病毒载体系统构建人GST-π基因的重组腺病毒 |
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| 引用本文： | 罗小辑,金先庆,陈瑾.应用AdEasy腺病毒载体系统构建人GST-π基因的重组腺病毒[J].重庆医科大学学报,2006,31(4):466-469,493. |
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| 作者姓名： | 罗小辑 金先庆 陈瑾 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属儿童医院外科,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的：利用AdEasy腺病毒载体系统构建人谷胱甘肽转移酶-π（GST-π）基因重组腺病毒并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒。方法：从质粒中通过PCR的方法扩增出目的基因GST-π并带有适宜的酶切位点，双酶切后连pAdtrackCMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrack-GST-π，经酶切线性化后，采用电穿孔转化到含腺病毒骨架质粒AdEasy1的BJ5183大肠杆菌电感受态细菌中，挑选同源重组质粒AdEasy-GST-π，酶切线性化重组质粒并转染HEK293细胞包装成重组病毒颗粒，荧光显微镜观察绿色荧光表达。重组病毒上清乒乓交互感染HEK293细胞，荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果：经限制性内切酶检测和GFP表达证实成功地构建了携带GST-π基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。结论：成功地构建了携带GST-π基因的重组腺病毒载体，为利用GST-π基因转染造血干细胞的基因治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 腺病毒 GST-π 基因工程 |
| 文章编号： | 0253-3626（2006）04-0466-04 |
| 收稿时间： | 2006-03-23 |
| 修稿时间： | 2006-03-23 |
Construction of recombinant adenovirus plasmid containing GST-π gene |
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| LUO Xiaoji, et al.Construction of recombinant adenovirus plasmid containing GST-π gene[J].Journal of Chongqing Medical University,2006,31(4):466-469,493. |
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| Authors: | LUO Xiaoji |
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