磁珠细胞分选CD133+/CD44+前列腺癌干细胞的初步鉴定

目的：通过磁珠细胞分选（magnetic bead cell sorting，MACS）方法从人前列腺癌细胞系PC-3中分选CD133+/CD44+干细胞，为进一步功能性研究奠定基础。方法：运用流式细胞仪（flow cytometry，FCM）检测MACS分选前后PC-3细胞膜上CD133和CD44表达情况；观察无血清培养成球情况，免疫荧光（immunofluorescence，IF）表达情况；比较细胞在分选前后的形态学、增殖能力方面的差异；免疫组化（immunohistochemistry，IHC）和Western blot检测诱导分化前后前列腺酸性磷酸酶（prostatic acid phos－phatase，PAP）蛋白情况。结果：FCM检测PC-3细胞CD133和CD44的阳性表达分别是（1.33±0.05）%和（0.87±0.06）%，而MACS分选后PAP分别为（84.82±0.07）%和（99.91±0.03）%；IF检测CD133+/CD44+细胞培养后继续呈阳性表达；CD133+/CD44+细胞增殖能力高于PC-3细胞（t=11.0，P=0.008）以及高于诱导后的CD133+/CD44+细胞（t=40.1，P=0.001）；CD133+/CD44+细胞经过转化生长因子-β诱导后IHC和Western blot检测PAP表达呈阳性，而未诱导的CD133+/CD44+细胞表达呈阴性。结论：MACS从PC-3细胞株中分选的CD133+/CD44+细胞经过初步功能性鉴定具有干细胞的某些特性，可为前列腺癌干细胞的进一步探索充当铺垫。

Initial identification of CD133+/CD44+ prostate cancer stem cell through magnetic bead cell sorting