| PCR及Real-time PCR评价细菌DNA提取方法 |
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| 引用本文： | 胡晓红,彭惠民,刘昕,共正根,袁科.PCR及Real-time PCR评价细菌DNA提取方法[J].重庆医科大学学报,2008,33(2):155-158. |
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| 作者姓名： | 胡晓红 彭惠民 刘昕 共正根 袁科 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室,重庆,400016;第三军医大学分子跗学教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 重庆市科学技术委员会科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法.方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100 NP40、Chelex-100 TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度.结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100 NP40 法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度.结论:Chelex-100 NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR.
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| 关 键 词： | DNA提取 PCR 实时荧光定量PCR |
| 文章编号： | 0253-3626(2008)02-0155-04 |
| 修稿时间： | 2007年5月14日 |
Methods of DNA extraction from bacteria for PCR and Real-time PCR |
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| HU Xiao-hong.Methods of DNA extraction from bacteria for PCR and Real-time PCR[J].Journal of Chongqing Medical University,2008,33(2):155-158. |
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| Authors: | HU Xiao-hong |
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