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pEGFP-N1-Fcy::Fur重组质粒的构建及其在卵巢癌细胞中的表达
引用本文:伍霞,钟玲,池余刚,蒋兴伟,王勇.pEGFP-N1-Fcy::Fur重组质粒的构建及其在卵巢癌细胞中的表达[J].重庆医科大学学报,2008,33(11):1330-1333.
作者姓名:伍霞  钟玲  池余刚  蒋兴伟  王勇
作者单位:重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010
基金项目:重庆市卫生局科研项目  
摘    要:目的:构建携带融合型自杀基因Fcy::Fur的荧光真核表达质粒pEGFP-N1-Fcy::Fur,并观察其在卵巢癌细胞中的表达.方法:应用基因重组技术,将pORF-Fcy::Fur中的Fcy::Fur目的基因亚克隆到荧光真核表达载体pEGFP-N1,以酶切1和测序鉴定重组质粒的正确性.应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入SKOV3细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)瞬时表达情况,用Western blot方法检测Fcy::Fur表达.结果:酶切和测序鉴定证实插入片段正确.细胞转染24 h后,荧光显微镜下观察到GFP表达.60%转染细胞发出绿色荧光.Western-blot检测到Fcy::Fur表达.结论:成功构建pEGFP-N1-Fcy::Fur荧光真核表达质粒,并可在卵巢癌细胞中有效表达,为卵巢癌基因治疗提供实验基础.

关 键 词:自杀基因  Fcy::Fur  绿色荧光蛋白  基因转染  真核表达载体

Construction of pEGFP-N1-Fcy::Fur recombinant plasmid and observation of its expression in ovarian cancer cells
Abstract:
Keywords:Fcy::Fur
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