| 丙型肝炎病毒ns5b基因的克隆、表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘卫东,薛小平,雷迎峰,尹文,吕欣.丙型肝炎病毒ns5b基因的克隆、表达及鉴定[J].第四军医大学学报,2003,24(14):1265-1267. |
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| 作者姓名： | 刘卫东 薛小平 雷迎峰 尹文 吕欣 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 陕西省自然科学基金项目 (2 0 0 1SM51 ) |
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| 摘 要： | 目的：构建HCV ns5b基因的重组原核表达质粒，并获得NS5B蛋白的高效表达，为制备抗NS5B抗体及以其为靶位的抗HCV感染研究创造条件。方法：利用PCR技术扩增HCV ns5b基因，Xho I和Kpn I双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体pRSETA上，转化大肠杆菌JM109菌株，获得阳性重组质粒pRSETA-ns5b，阳性质粒转化BL21(DE3)，IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE和Western Blot电泳进行鉴定，并以薄层扫描分析对其定量。结果：成功构建了HCV NS5B蛋白表达载体pRSETA-ns5b，经诱导明显表达出6His-NS5B融合蛋白，表达产物主要以包涵体形式存在，表达量占菌体蛋白25％，Western—Blot结果显示表达蛋白保持活性。结论：HCV NS5B蛋白在体外得到了有效表达。
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| 关 键 词： | C型肝炎样病毒属 非结构区5B蛋白 重组融合蛋白质类 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2003)14-1265-03 |
| 修稿时间： | 2003年2月10日 |
Cloning, expression and identification of HCV ns5b gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C like Viruses non structure 5B protein recombinant fusion proteins gene expression |
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