| 人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 杨俊霞,石华,魏丽丽,袁成福,陈济,易发平,马永平,宋方洲.人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立[J].第四军医大学学报,2007,28(3):210-213. |
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| 作者姓名： | 杨俊霞 石华 魏丽丽 袁成福 陈济 易发平 马永平 宋方洲 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学:生物化学与分子生物学教研室,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学:药理学教研室,重庆,400016
2. 重庆医科大学:生物化学与分子生物学教研室,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的:构建人MCHR2真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染细胞系. 方法:采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1( ),经酶切和PCR鉴定后,脂质体转染法转染HEK293细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,RT-PCR,Western Blot及免疫荧光法检测MCHR2的表达. 结果:成功构建了pcDNA3.1-MCHR2真核表达载体并已稳定转入HEK293细胞,建立了稳定转染细胞系,成功地表达目的基因. 结论:稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究MCHR2的功能提供了良好的实验基础.
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| 关 键 词： | 真核表达载体 转染 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2007)03-0210-04 |
| 修稿时间： | 2006-05-16 |
Construction of eukaryotic expression vector of human MCHR2 and establishment of stably transfected cell line |
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| YANG Jun-Xia,SHI Hua,WEI Li-Li,YUAN Cheng-Fu,CHEN Ji,YI Fa-Ping,MA Yong-Ping,SONG Fang-Zhou.Construction of eukaryotic expression vector of human MCHR2 and establishment of stably transfected cell line[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2007,28(3):210-213. |
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| Authors: | YANG Jun-Xia SHI Hua WEI Li-Li YUAN Cheng-Fu CHEN Ji YI Fa-Ping MA Yong-Ping SONG Fang-Zhou |
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| Institution: | 1.Department of Biochemistry and Molecular Biology, Chongqing Key Laboratory of Biochemistry and Molecular Pharmacology, Key Laboratory of Clinical Laboratory Diagnostics of Ministry of Education, 2Department of Pharmacology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MCHR2 |
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