| PSMA-IRES-FCY1-TK真核表达载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 殷缨,路凡,苏明权,郝晓柯.PSMA-IRES-FCY1-TK真核表达载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达[J].第四军医大学学报,2005,26(12):1112-1115. |
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| 作者姓名： | 殷缨 路凡 苏明权 郝晓柯 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学,西京医院检验科分子生物学实验室,陕西,西安,710033
2. 第四军医大学,基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的: 构建前列腺特异性膜抗原(PSMA)启动子调控表达的FCY1/TK双自杀基因表达载体,并观察单、双自杀基因对前列腺癌细胞LNCaP的杀伤作用.方法: 通过PCR方法扩增出基因组DNA中PSMA启动子,利用基因重组的方法,替换真核表达载体pIRES中的CMV启动子.测序正确后,再将自杀基因FCY1和HSV-TK分别克隆于载体pIRES的两个多克隆位点,构建真核表达载体pPSMA-IRES-FCY1-TK.将该载体转染LNCaP细胞,用RT-PCR的方法检测其转录,用MTT法检测前体药物5-氟胞嘧啶、丙氧鸟苷单一或联合使用对转染后的LNCaP细胞的杀伤作用.结果: PCR扩增出长1400 bp的PSMA启动子片段,经克隆至pIRES后酶切鉴定证实,并测序表明序列与GenBank(Accession Number AF007544)报道的一致.pPSMA-IRES-FCY1-TK经脂质体转染LNCaP细胞后,RT-PCR检测到FCY1和TK基因在该细胞中均有转录.MTT法检测表明5-FC与GCV联合使用,其细胞生长抑制率明显高于单独使用5-FC,GCV(P<0.05). 结论: pPSMA-IRES-FCY1-TK的双自杀基因体系对前列腺癌细胞LNCaP细胞的杀伤作用,明显优于单自杀基因体系.
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| 关 键 词： | 前列腺特异性膜抗原 前列腺肿瘤 |
| 文章编号： | 1000-2790(2005)12-1112-04 |
| 修稿时间： | 2005年2月28日 |
Construction of PSMA-IRES-FCY1-TK eukaryotic expression vector and its expression in prostate cancer cell line |
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| YIN Ying,LU Fan,SU Ming-Quan,HAO Xiao-Ke.Construction of PSMA-IRES-FCY1-TK eukaryotic expression vector and its expression in prostate cancer cell line[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2005,26(12):1112-1115. |
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| Authors: | YIN Ying LU Fan SU Ming-Quan HAO Xiao-Ke |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FCY1 HSV-TK |
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